Auslegung Der Ergebnisse - 3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen

6. Beladen Sie eine saubere und dekontaminierte 3M Molekulare Detektion – Beladehilfe mit den mit Kappen
verschlossenen Gefäßen. Schließen und verriegeln Sie die Klappe.
7. Überprüfen und bestätigen Sie die Konfiguration des Testdurchlaufs in der 3M Molekulare Detektion – Software.
8. Klicken Sie auf die Schaltfläche „Start" in der Software und wählen Sie anschließend das zu verwendende Gerät aus.
Die Klappe des gewählten Geräts öffnet sich automatisch.
9. Setzen Sie die 3M Molekulare Detektion – Beladehilfe in das 3M Molekulare Detektion – Gerät und schließen Sie
die Klappe, um mit dem Test zu beginnen. Die Ergebnisse sind innerhalb von 60 Minuten verfügbar, obgleich positive
Ergebnisse möglicherweise schneller erfasst werden.
10. Nehmen Sie nach Abschluss des Tests die 3M Molekulare Detektion – Beladehilfe aus dem 3M Molekulare Detektion –
Gerät und entsorgen Sie die Gefäße, indem Sie sie 1 Stunde lang in ausreichender Entfernung vom Vorbereitungsbereich
in einer 1-5%igen Haushaltsbleichmittellösung (v:v in Wasser) einweichen.
HINWEIS: Um das Risiko eines falsch positiven Ergebnisses infolge einer Kreuzkontamination zu minimieren,
öffnen Sie niemals Reagenzgefäße, die amplifizierte DNS enthalten. Dies betrifft die 3M Reagenzkontrolle,
Reagenzgefäße für den 3M Molekulare Detektion – E. coli O157 (einschl. H7) Nachweis 2 und Gefäße für die
3M Matrixkontrolle. Entsorgen Sie die verschlossenen Reagenzgefäße, indem Sie sie 1 Stunde lang in ausreichender
Entfernung vom Vorbereitungsbereich in einer 1–5%igen Haushaltsbleichmittellösung (v:v in Wasser) einweichen.

Auslegung der Ergebnisse

Die durch die Detektion der Nukleinsäureamplifikation entstehende Lichtkurve wird anhand eines Algorithmus
ausgewertet. Die Ergebnisse werden automatisch von der Software analysiert und je nach Ergebnis farbcodiert. Ein
positives oder negatives Ergebnis wird durch die Analyse einer bestimmten Anzahl an eindeutigen Kurvenparametern
bestimmt. Die vorläufigen positiven Ergebnisse werden in Echtzeit erstellt, während negative und zu überprüfende
Ergebnisse erst nach Abschluss des Testdurchlaufs dargestellt werden.
Vorläufig positive Ergebnisse sollten anhand der Standardarbeitsanweisung (SOP) für Laboratorien oder durch das
anschließende Referenzverfahren
BPW ISO in die Zweitanreicherungsbouillon, gefolgt von anschließendem Ausplattieren und Bestätigen von Isolaten mittels
geeigneter biochemischer und serologischer Verfahren.
HINWEIS: Selbst ein negatives Ergebnis führt nicht zu einem Ergebnis von null, da das System und die Amplifika-
tionsreagenzien des 3M Molekulare Detektion – E. coli O157 (einschl. H7) Nachweises 2 über einen „Hintergrund"
verfügen, der in relativem Verhältnis zur Lichteinheit (RLU) steht.
Falls es in seltenen Fällen zu einer ungewöhnlichen Lichtleistung kommt, wird diese vom Algorithmus als „Zu überprüfen"
gekennzeichnet. 3M empfiehlt, den Nachweis der so gekennzeichneten Proben zu wiederholen. Falls das Ergebnis
weiterhin als „Zu überprüfen" gekennzeichnet bleibt, bestätigen Sie das Ergebnis anhand Ihres bevorzugten Testverfahrens
oder gemäß den jeweils geltenden Richtlinien.
Bei abweichenden Ergebnissen (mutmaßlich positiven beim 3M Molekulare Detektion – E. coli O157 (einschl. H7)
Nachweis 2, unbestätigten Ergebnissen eines der zuvor genannten Verfahren und insbesondere für die Latexpartikel-
Agglutination) muss das Labor die erforderlichen Maßnahmen befolgen, um die Richtigkeit der erhaltenden
Ergebnisse sicherzustellen.
Bestätigung der Ergebnisse anhand der zertifizierten NF VALIDATION-Methode
Alle im Rahmen der NF VALIDATION vom 3M Molekulare Detektion – E. coli O157 (einschl. H7) Nachweis 2 als positiv
identifizierte Proben müssen durch einen der nachfolgenden Tests bestätigt werden:
Option 1: Nach ISO 16654
Option 2: Durchführung eines Bestätigungsverfahrens mit Folgendem: Verstreichen Sie 50 μl der Anreicherung mit
gepuffertem Peptonwasser
Inkubieren Sie sie für 24 ± 3 Stunden bei 37 °C. Streichen Sie charakteristische Kolonien auf dem Nähragar aus und führen
Sie eine Latexpartikel-Agglutination direkt auf den isolierten Kolonien durch. Werden die Ergebnisse des 3M Molekulare
Detektion – E. coli O157 (einschl. H7) Nachweises 2 nicht bestätigt, führen Sie eine immunomagnetische Separation durch
und verstreichen 50 μl auf dem CT-SMAC.
bestätigt werden, beginnend mit der Übertragung aus der Erstanreicherung mit
(1,2,3)
standardmäßig mit Anreicherung von gepuffertem Peptonwasser
(3)
auf eine Cefixime Potassium Tellurite Sorbitol MacConkey (CT-SMAC)
(3)
20 µL
9
(Deutsch)
DE
.
(3)
-Agarplatte.
(3)