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3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 40

Molekulare detektion
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4. È necessario un tubo per Soluzione di lisi 3M per ciascun campione e per il campione Controllo Negativo (NC)
(terreno di arricchimento sterile).
4.1
Le strisce di tubi per Soluzione di lisi 3M possono essere tagliate nel numero di tubi per Soluzione di lisi
3M desiderato. Selezionare il numero necessario di strisce dei tubi della Soluzione di lisi 3M singole o da 8 tubi.
Posizionare i tubi per Soluzione di lisi 3M in una rastrelliera vuota.
4.2 Al fine di evitare la contaminazione crociata, stappare una striscia di tubi per Soluzione di lisi 3M alla volta
e utilizzare una nuova punta di pipetta per ciascuna fase di trasferimento.
4.3 Trasferire il campione arricchito nei tubi per Soluzione di lisi 3M come descritto di seguito:
Trasferire innanzitutto ciascun campione arricchito in un tubo per Soluzione di lisi 3M singolo. Trasferire
l'NC per ultimo.
4.4 Utilizzare lo Strumento di inserimento/rimozione del tappo per il rilevamento molecolare 3M™ - Lisi per rimuovere
il tappo da una striscia di tubi per Soluzione di lisi 3M, una striscia alla volta.
4.5 Gettare via il tappo del tubo per Soluzione di lisi 3M; se il lisato viene conservato per effettuare nuovamente il test,
posizionare i tappi in un contenitore pulito per consentirne la riapplicazione dopo la lisi.
4.5.1 Per l'elaborazione del lisato conservato, consultare l'Appendice A.
4.6 Trasferire 20 µl di campione in un tubo di Soluzione di lisi 3M, a meno che non venga indicato altrimenti nelle
tabelle dei protocolli 2, 3 o 4.
5. Ripetere il punto 4.3 finché ciascun singolo campione non è stato aggiunto al tubo di Soluzione di lisi
3M corrispondente nella striscia.
6. Ripetere i punti da 4.1 a 4.6 fin quando è necessario, per il numero di campioni da testare.
7. Quando tutti i campioni sono stati trasferiti, trasferire 20 μl di NC (terreno di arricchimento sterile, ad esempio
BPW ISO) in un tubo per Soluzione di lisi 3M. Non utilizzare l'acqua come NC.
8. Verificare che la temperatura dell'Inserto del blocco di calore per il sistema di rilevamento molecolare 3M sia
a 100 ± 1 °C.
9. Posizionare la rastrelliera per tubi per Soluzione di lisi 3M, scoperta, nell'Inserto del blocco di calore per il sistema di
rilevamento molecolare 3M e riscaldare per 15 ± 1 minuti. Durante il riscaldamento, la Soluzione di lisi 3M virerà dal rosa
(freddo) al giallo (caldo).
I campioni non correttamente trattati termicamente durante la fase di lisi dell'analisi possono essere considerati
un potenziale rischio biologico e NON devono essere inseriti nello Strumento per l'analisi molecolare 3M.
10. Rimuovere la rastrelliera scoperta dei tubi della Soluzione di lisi 3M dal blocco di calore e lasciarla raffreddare nel
Blocco di raffreddamento estraibile per il sistema di rilevamento molecolare 3M per almeno 5 minuti e per un massimo
di 10 minuti. Il Blocco di raffreddamento estraibile per il sistema di rilevamento molecolare 3M, utilizzato a temperatura
ambiente senza il Vassoio per blocco di raffreddamento estraibile per il sistema di rilevamento molecolare 3M, deve
essere posto direttamente sul banco del laboratorio. Quando è fredda, la soluzione di lisi torna a essere di colore rosa.
11. Rimuovere la rastrelliera dei tubi per soluzione di lisi 3M dal Blocco di raffreddamento estraibile per il sistema di
rilevamento molecolare 3M.
00:15:00
99-101ºC
00:05:00
7
(Italiano)
IT
20 µl
20-25ºC

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