3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 106

9. Aseta 3M Molekyläärisen testinopeuden latausalusta 3M Molekylääriseen testi-instrumenttiin ja aloita testi sulkemalla
kansi. Saat tulokset 60 minuutin kuluessa, positiiviset tulokset saatetaan kuitenkin havaita jo aikaisemmin.
10. Kun testi on suoritettu loppuun, ota 3M Molekyläärisen testinopeuden latausalusta 3M Molekyläärisestä testi-
instrumentista ja hävitä putket liottamalla niitä 1–5-prosenttisessa (veteen laimennetussa) talouskäyttöisessä
valkaisuaineliuoksessa 1 tunnin ajan ja etäällä testin valmistelualueelta.
HUOMAUTUS: Jotta ristikontaminaation aiheuttamien väärien positiivisten riski olisi mahdollisimman pieni,
älä koskaan avaa monistettua DNA:ta sisältäviä reagenssiputkia. Tämä koskee 3M Reagenssin valvontaa,
3M Molekyläärinen testisetti 2 - E. coli O157 (sisältäen H7) -reagenssiputkea ja 3M Testitaulukon valvontaputkia.
Hävitä tiiviisti suljetut reagenssiputket aina liottamalla niitä 1–5 tilavuusprosenttisella (veteen laimennetulla)
talouskäyttöisellä valkaisuliuoksella 1 tunnin ajan ja etäällä testin valmistelualueelta.
Tulokset ja tulkinta
Algoritmi tulkitsee nukleiinihappojen monistuksen tunnistuksesta saatavaa valon sirontakäyrää. Ohjelmisto analysoi tulokset
automaattisesti, ja tulokset värikoodataan tuloksen mukaan. Positiivinen tai negatiivinen tulos määritetään analysoimalla
useita yksilöllisiä käyräparametreja. Oletetut positiiviset tulokset ilmoitetaan reaaliaikaisesti, kun taas negatiiviset ja
tarkastettavat tulokset näytetään ajon valmistumisen jälkeen.
Oletetut positiiviset näytteet on vahvistettava laboratorion vakiotoimintamenetelmien mukaisesti tai noudattamalla
asianmukaista vertailumenetelmää
toissijaiseen rikastusliemeen/-liemiin, mitä seuraa siirrostus ja isolaattien vahvistaminen asianmukaisilla biokemiallisilla ja
serologisilla menetelmillä.
HUOMAUTUS: Negatiivinenkaan näyte ei anna nollalukemaa, sillä järjestelmällä ja 3M Molekyläärinen testisetti
2 - E. coli O157 (sisältäen H7) monistusreagensseilla on tausta-RLU-lukema (suhteellinen valoyksikkö).
Joissain harvoissa tapauksissa valon sironta voi olla epätavallinen, jolloin algoritmi merkitsee sen tarkastettavaksi.
3M suosittelee testin uusimista tarkastettavaksi merkittyjen näytteiden osalta. Jos tulokseksi tulee jatkuvasti Inspect, tee
varmistustesti käyttämällä itse parhaaksi katsomaasi menetelmää tai paikallisten määräysten mukaista menetelmää.
Jos tulokset ovat ristiriitaisia (oletettu positiivinen tulos 3M Molekyläärinen testisetti 2 - E. coli O157 (sisältäen H7), jota ei
saada vahvistettua jollakin edellä kuvatuista tavoista, erityisesti lateksiagglutinaatiokoe), laboratorion on tehtävä tarvittavat
toimenpiteet saatujen tulosten validoimiseksi.
Tulosten vahvistaminen NF VALIDATION -sertifioidun menetelmän mukaisesti
NF VALIDATIONin yhteydessä kaikki 3M Molekyläärisellä testisetillä 2 - E. coli O157 (sisältäen H7) määritetyt positiiviset
näytteet tulee vahvistaa jollain seuraavista testeistä:
Vaihtoehto 1: Käyttämällä ISO 16654
Vaihtoehto 2: Soveltamalla seuraavista vaiheista koostuvaa vahvistusmenetelmää: Siirrä 50 μl puskuroitua peptonivettä
sisältävää rikastusliuosta Kefiksiimi-kaliumtelluriitti-sorbitoli-MacConkey (CT-SMAC)
ajan 37 °C:ssa. Siirrä tunnusomaiset pesäkkeet ravinneagarille ja tee lateksiagglutinaatiokoe suoraan eristetyille
pesäkkeille. Jolleivät 3M Molekyläärisen testisetin 2 - E. coli O157 (sisältäen H7) -tulokset vahvistu, tee immunogeneettinen
erottaminen ja siirrä 50 μl CT-SMAC-levylle.
Vaihtoehto 3: Käyttämällä EN ISO 7218
(puhdistettuihin tai puhdistamattomiin) pesäkkeisiin (katso vaihtoehdot 1 tai 2). DNA-koettimien on oltava erilaisia kuin
3M Molekyläärisessä testisetissä 2 - E. coli O157 (sisältäen H7) käytetyt koettimet.
Vaihtoehto 4: Käyttämällä jotain muuta NF VALIDATION -sertifioitua menetelmää, jonka periaatteen on oltava erilainen
kuin 3M Molekyläärisessä testisetissä 2 - E. coli O157 (sisältäen H7). On käytettävä tälle toiselle validoidulle menetelmälle
kuvattua koko käytäntöä. Kaikkien vahvistamisen alkua edeltävien vaiheiden on oltava kummallekin menetelmälle yhteisiä.
Jos tulokset ovat ristiriitaisia (vaihtoehtoisella menetelmällä saatu oletettu positiivinen tulos, jota ei saada vahvistettua
jollakin edellä kuvatuista tavoista), laboratorion on tehtävä tarvittavat toimenpiteet saadun tuloksen validoimiseksi.
Jos sinulla on jotain tiettyä sovellusta tai menetelmää koskevia kysymyksiä, käy verkkosivuillamme osoitteessa
www.3M.com/foodsafety tai ota yhteyttä paikalliseen 3M-edustajaan tai -jälleenmyyjään.
Liite A. Käytännön keskeytys: Näytteiden säilyttäminen ja uudelleentestaus
1. Säilytä lämpökäsitelty lysaatti sulkemalla lyysiputki uudelleen puhtaalla suojuksella (katso Lyysi-osio, 4.5).
aloittamalla näytteen siirrosta ensisijaisesta BPW ISO -rikastusliemestä
(1,2,3)
-standardia aloittaen puskuroidulla peptonivedellä
(3)
-standardissa kuvattuja DNA-koettimia CT-SMAC-levyltä eristettyihin
(5)
(Suomenkielinen)
FI
-agarlevylle. Inkuboi 24 ± 3 tunnin
(3)
9
rikastamisesta.
(3)
(3)