3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 53

6. Cargue los tubos tapados en una Bandeja de Carga Rápida para el Sistema de Detección Molecular 3M limpia
y descontaminada. Luego cierre la tapa.
7. Revise y confirme la corrida configurada en el Software de Detección Molecular 3M.
8. Haga clic en el botón de inicio del software y seleccione el equipo que usará. La tapa del equipo seleccionado
se abrirá automáticamente.
9. Coloque la Bandeja de Carga Rápida para el Sistema de Detección Molecular 3M en el Equipo de Detección Molecular
3M y cierre la tapa para comenzar con el ensayo. Obtendrá los resultados al cabo de 60 minutos, aunque los positivos
pueden detectarse antes.
10. Una vez terminado el ensayo, retire la Bandeja de Carga Rápida para el Sistema de Detección Molecular 3M del Equipo
de Detección Molecular 3M y deseche los tubos sumergiéndolos en una solución de cloro de uso doméstico del
1 % al 5 % (v:v en agua) durante 1 hora y lejos del área en que se prepara el ensayo.
ATENCIÓN: Para minimizar el riesgo de falsos positivos a causa de contaminación cruzada, nunca abra tubos
de reactivo que contengan ADN amplificado. Esto incluye el Control de Reactivos 3M, el Tubo de Reactivos
del Análisis de Detección Molecular 2 para E. coli O157 (incluido H7) 3M y los Tubos de Control de Matriz 3M.
Siempre deseche los tubos de reactivo sellados sumergiéndolos en una solución de lejía de uso doméstico al
1 % a 5 % (v:v en agua) durante 1 hora y lejos del área en que se prepara el análisis.
Resultados e interpretación
Un algoritmo interpreta la curva de producción de luz que se obtiene de la detección de ácido nucleico amplificado.
El software analiza automáticamente los resultados y los expresa en color según el resultado. Los resultados Positivo o
Negativo se determinan mediante el análisis de una cantidad de parámetros característicos de la curva. Los resultados
presuntivos positivos se informan en tiempo real, mientras que los resultados Negativo e Inspeccionar se muestran una vez
terminado el análisis.
Las muestras con resultados presuntivos positivos deben ser confirmadas de acuerdo con los procedimientos operativos
estándar del laboratorio o mediante la confirmación del método de referencia apropiado
transferencia del caldo de enriquecimiento primario BPW ISO al secundario, seguido del subsiguiente sembrado en placa
y la confirmación de aislados, utilizando métodos bioquímicos y serológicos apropiados.
NOTA: Incluso una muestra negativa no arrojará una lectura de cero, ya que el sistema y los reactivos de amplificación
del Análisis de Detección Molecular 2 para E. coli O157 (incluido H7) 3M tienen unidades relativas de luz de fondo (RLU).
En el raro caso de que haya una interrupción inusual del suministro eléctrico, el algoritmo lo señalará como "Inspeccionar".
3M recomienda al usuario repetir el ensayo para aquellas muestras etiquetadas como Inspeccionar. Si el resultado sigue
siendo Inspeccionar, continúe con la prueba de confirmación usando su método preferido o según se especifique en las
reglamentaciones locales.
En caso de resultados discordantes (presuntamente positivos con el Análisis de Detección Molecular 2 para E. coli
O157 (incluido H7) 3M no confirmados por alguno de los medios descritos anteriormente y, en particular, la prueba de
aglutinación de látex), el laboratorio debe seguir los pasos necesarios para garantizar la validez de los resultados obtenidos.
Confirmación de los resultados según el Método Certificado de NF VALIDATION
En el contexto de NF VALIDATION, todas las muestras identificadas como positivas por el Análisis de Detección Molecular
2 para E. coli O157 (incluido H7) 3M deben ser confirmadas mediante una de las siguientes pruebas:
Opción 1: uso de la norma ISO 16654
Opción 2: mediante la implementación de un método de confirmación compuesto por lo siguiente: Utilice la técnica
de rayado con 50 μL del enriquecimiento de agua peptonada tamponada
suplementado con cefixima y telurito de potasio (CT-SMAC)
las colonias típicas en agar de nutrientes y realice la prueba de aglutinación de látex directamente en las colonias aisladas.
Si no se confirman los resultados del Análisis de Detección Molecular 2 para E. coli O157 (incluido H7) 3M, realice un paso
de separación inmunomagnética y, luego, realice un rayado con 50 μL en CT-SMAC.
a partir del enriquecimiento de agua peptonada tamponada
(3)
. Incube durante 24 ± 3 horas a 37 °C. Realice un rayado de
(3)
9
20 µL
(1,2,3)
en una placa agar MacConkey sorbitol
(3)
(Español)
ES
, comenzando con la
.
(3)