3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 138

UWAGA: Przed włożeniem Tacy 3M urządzenia szybkiego ładowania testów do diagnostyki molekularnej z probówkami
reakcyjnymi Urządzenie 3M do diagnostyki molekularnej musi osiągnąć i utrzymać temperaturę 60°C. Etap nagrzewania
trwa około 20 minut i sygnalizuje go POMARAŃCZOWA kontrolka na pasku stanu urządzenia. Kiedy urządzenie będzie
gotowe do rozpoczęcia analizy, kolor paska stanu zmieni się na ZIELONY.
Liza
1. Umożliwić ogrzanie probówek z roztworem lizującym 3M, pozostawiając stojak w temperaturze pokojowej (20–25°C)
na noc (16–18 godzin). Alternatywą dla równoważenia temperatury probówek z roztworem lizującym 3M do
temperatury pokojowej jest pozostawienie probówek z roztworem lizującym 3M na stole laboratoryjnym na co najmniej
2 godziny, inkubacja probówek z roztworem lizującym 3M w inkubatorze nastawionym na 37 ± 1°C przez 1 godzinę lub
umieszczenie ich w suchym podwójnym bloku grzewczym na 30 sekund w temperaturze 100°C.
2. Odwrócić probówki zamknięte korkiem w celu wymieszania ich zawartości. Przejść do następnego kroku
w ciągu 4 godzin.
3. Wyjąć bulion przednamnażający z inkubatora.
4. Dla każdej próbki oraz próbki Kontroli ujemnej (NC) (sterylnego podłoża do przednamnażania) wymagana jest jedna
probówka z roztworem lizującym 3M.
4.1 Taśmy z probówkami z roztworem lizującym 3M można dociąć do żądanej liczby probówek z roztworem lizującym
3M. Zależnie od sytuacji należy dobrać liczbę pojedynczych probówek z roztworem lizującym 3M lub taśm
złożonych z 8 probówek. Umieścić probówki z roztworem lizującym 3M w pustym stojaku.
4.2 Aby uniknąć zanieczyszczeń krzyżowych, należy otwierać taśmy z probówkami z roztworem lizującym 3M
pojedynczo i na każdym etapie przenoszenia stosować nową końcówkę pipety.
4.3 Przednamnożoną próbkę należy przenieść do probówek z roztworem lizującym 3M w opisany poniżej sposób:
Najpierw przenieść każdą przednamnożoną próbkę do pojedynczej probówki z roztworem lizującym 3M.
Na końcu przenieść NC.
4.4 Do zdejmowania korków taśmy z probówkami z roztworem lizującym 3M (po jednej taśmie na raz) należy
wykorzystać Narzędzie 3M™ do zakładania/zdejmowania korków probówek do diagnostyki molekularnej – Liza.
4.5 Zdjąć korek probówki z roztworem lizującym 3M – jeśli lizat będzie zachowany do celów ponownego wykonania
testu, umieścić korki w czystym pojemniku do ponownego założenia po wykonaniu lizy.
4.5.1 Odnośnie obróbki zachowanego lizatu patrz Załącznik A.
4.6 Przenieść 20 µl próbki do probówki z roztworem lizującym 3M, o ile nie podano inaczej w protokole
zamieszczonym w Tabeli 2, 3 i 4.
5. Powtarzać krok 4.3 do momentu dodania każdej indywidualnej próbki do odpowiedniej probówki z roztworem
lizującym 3M w taśmie.
6. Kroki od 4.1 do 4.6 należy powtarzać zależnie od potrzeby dla wszystkich próbek poddawanych badaniu.
7. Po przeniesieniu wszystkich próbek przenieść 20 µl NC (jałowe podłoże do przednamnażania, np. BPW wg ISO)
do probówki z roztworem lizującym 3M. Nie stosować wody jako NC.
8. Upewnić się, że temperatura Wkładki 3M bloku grzewczego do diagnostyki molekularnej wynosi 100 ± 1°C.
9. Umieścić odkryty stojak na probówki z roztworem lizującym 3M we Wkładce 3M bloku grzewczego do diagnostyki
molekularnej i ogrzewać przez 15 ± 1 min. Podczas ogrzewania roztwór lizujący 3M zmieni barwę z różowej (chłodny)
na żółtą (gorący).
Próbki, które nie przeszły odpowiedniej obróbki cieplnej na etapie lizy, można uznać za potencjalne zagrożenie
biologiczne i NIE należy ich umieszczać w Urządzeniu 3M do diagnostyki molekularnej.
7
(Polski)
PL
20 µl