3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 21

Option 3 : utilisation de sondes nucléiques tel que décrit dans la norme EN ISO 7218
(purifiées ou non) obtenues sur la gélose CT-SMAC (voir option 1 ou 2). Les sondes nucléiques doivent être différentes
de celles utilisées dans le kit de détection moléculaire 2 - E. coli O157 3M (incluant H7).
Option 4 : utilisation de n'importe quelle autre méthode de certification NF VALIDATION, dont le principe doit être
différent du kit de détection moléculaire 2 - E. coli O157 3M (incluant H7). Il convient d'utiliser l'intégralité du protocole
décrit pour cette seconde méthode de validation. Toutes les étapes précédant le début de la confirmation doivent être
communes aux deux méthodes.
En cas de résultats contradictoires (positif présumé avec l'autre méthode, non confirmé par l'un des moyens décrits
ci-dessus), le laboratoire doit suivre les procédures nécessaires pour garantir la validité du résultat obtenu.
Pour toute question concernant des applications ou procédures spécifiques, consulter notre site Internet à l'adresse
www.3M.com/foodsafety ou contacter votre représentant ou distributeur 3M local.
Annexe A. Interruption du protocole : conservation et nouveau test des échantillons
1. Pour conserver un lysat soumis à un traitement thermique, refermer le tube de lyse avec un bouchon propre
(voir la section Lyse, 4.5).
2. Pour conserver un échantillon enrichi, incuber pendant au moins 18 heures avant la conservation.
3. Stocker à une température comprise entre 4 et 8 °C jusqu'à 72 heures.
4. Préparer un échantillon conservé pour amplification en retournant 2 à 3 fois pour mélanger.
5. Ouvrir les tubes.
6. Placer les tubes pour lysats mélangés dans le support de bloc chauffant pour système de détection moléculaire
3M et chauffer à 100 ± 1 °C pendant 5 ± 1 minutes.
7. Retirer le portoir de tubes de solution de lyse 3M du bloc chauffant et laisser refroidir dans le support de bloc
refroidissant pour système de détection moléculaire 3M pendant une durée comprise entre 5 et 10 minutes.
8. Poursuivre le protocole à la section Amplification détaillée ci-dessus.
Références :
1. US Food and Drug Administration Bacteriological Analytical Manual. Chapter 4A: Diarrheagenic Escherichia coli.
November 2015.
2. US Department of Agriculture (USDA) FSIS Microbiology Laboratory Guidebook 5.09. Detection, Isolation and
Identification of Escherichia coli O157:H7 from Meat Products and Carcass and Environmental Sponges. Effective Date:
15 January 2015.
3. ISO 16654:2001 Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection of Escherichia
coli O157.
4. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General rules for microbiological examination.
6. ISO 6887. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension and decimal
dilutions for microbiological examination.
7. Installation Qualification (IQ)/Operational Qualification (OQ) 3M
Explication des symboles
www.3M.com/foodsafety/symbols
, à partir de colonies isolées
(5)
Molecular Detection System. 3M Food Safety.
TM
10
(Français)
FR