3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 95

6. Sett lukkede rør over i et rent og dekontaminert 3M Brett til hurtiglading for molekylær deteksjon. Lukk og lås
lokket deretter.
7. Se igjennom og bekreft den konfigurerte gjennomkjøringen i programvaren for 3M Molekylær deteksjon.
8. Klikk på startknappen i programvaren og velg instrumentet som skal brukes. Det valgte instrumentets lokk
åpnes automatisk.
9. Plasser 3M Brett til hurtiglading for molekylær deteksjon inn i 3M Instrument for molekylær deteksjon og lukk lokket for
å starte testen. Resultatene er klare innen 60 minutter, mens positive resultat kan bli oppdaget raskere.
10. Etter at testen er fullført, fjern 3M Brett til hurtiglading for molekylær deteksjon fra 3M Instrument for molekylær
deteksjon og kvitt deg med rørene ved å senke dem i en 1-5 % (volumandel i vann) husholdningsblekemiddel i 1 time og
borte fra testens forberedelsesområde.
MERKNAD: For å redusere risikoen for falske positive resultater på grunn av krysskontaminering skal aldri
reagensrør som inneholder amplifisert DNA, åpnes. Dette omfatter 3M Reagenskontroll, 3M Molekylær
deteksjonstest 2 for E. coli O157 (inkludert H7) Reagensrør og 3M Matrisekontrollrør. Kasser alltid de forseglede
reagensrørene ved å bløtlegge dem i 1-5 % (volumdeler i vann) oppløsning av husholdningsblekemiddel i en 1 time
og unna testens forberedelsesområde.
Resultater og tolkning
En algoritme tolker lyseffektskurven som er resultatet av deteksjonen av nukleinsyre-amplifikasjon. Resultatene
analyseres automatisk av programvaren og er fargekodet basert på resultatet. Et positivt eller negativt resultat fastslås
av analysen av flere unike kurveparametere. Antatt positive resultater rapporteres i sann tid, mens negative og «Inspect»
(inspiser)-resultater vil vises etter at gjennomkjøringen er fullført.
Antatte positive prøver må bekreftes i henhold til laboratoriets standard operasjonsprosedyrer eller ved å følge den aktuelle
referansemetoden for bekreftelse
anrikningsbuljong(er), etterfulgt av påfølgende plettering og bekreftelse av isolater ved hjelp av egnede biokjemiske og
serologiske metoder.
MERK: Ikke engang en negativ prøve vil gi et null-resultat ettersom systemet og 3M Molekylær deteksjonstest
2 for E. coli O157 (inkludert H7) har en «bakgrunns» relativ lysenhet (RLU).
I et sjeldent tilfelle av eventuelle uvanlige lyseffekter, merker algoritmen dette som «Inspect». 3M anbefaler brukeren å
gjenta testen for alle «Inspect»-prøver. Dersom resultatet fortsatt er «Inspect», fortsett til bekreftelsestesten og bruk din
foretrukne metode eller som oppgitt av lokale forskrifter.
I tilfelle forskjellige resultater (antatt positiv med 3M Molekylær deteksjonstest 2 for E. coli O157 (inkludert H7), ikke
bekreftet av én av metodene beskrevet ovenfor, og spesielt for lateks agglutinasjon-testen), må laboratoriet følge de
nødvendige trinnene for å sikre validitet til resultatene som er oppnådd.
Bekreftelse av resultatene i henhold til sertifiseringsmetoden NF VALIDATION
I konteksten til NF VALIDATION, må alle prøver som identifiseres som positive av 3M Molekylær deteksjonstest
2 for E. coli O157 (inkludert H7) bekreftes av en av de følgende testene:
Alternativ 1: Bruke ISO 16654
Alternativ 2: Implementere en bekreftelsesmetode som består av følgende: Stryk 50 μL av bufret peptonvann
anrikningen i en Cefixime Potassium Tellurite Sorbitol MacConkey (CT-SMAC)
ved 37 °C. Stryk karakteristikkolonier på næringsagar og gjennomfør latex agglutinasjon-test direkte på de isolerte
koloniene. Hvis 3M Molekylær deteksjonstest 2 for E. coli O157 (inkludert H7)-resultatene ikke er bekreftet, gjennomfør et
immunomagnetisk separasjonstrinn og stryk deretter 50 μL på CT-SMAC.
Alternativ 3: Bruk av nukleinsyre-prober som beskrevet i EN ISO 7218
ikke) fra CT-SMAC (se alternativ 1 eller 2). Nukleinsyre-probene må være annerledes enn de som brukes i 3M Molekylær
deteksjonstest 2 for E. coli O157 (inkludert H7).
, som begynner med overføring fra den primære BPW ISO anrikningen til sekundær
(1,2,3)
-standarden som starter fra den bufrede peptonvann
(3)
20 µL
anrikningen.
(3)
agarplate. Inkuber i 24 ± 3 timer
(3)
standarden, utført på isolerte koloner (renset eller
(5)
8
(Norsk)
NO
-
(3)