3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 54

Opción 3: mediante el uso de sondas de ácido nucleico tal como se describen en la norma EN ISO 7218
colonias aisladas (purificadas o no) de CT-SMAC (consulte las Opciones 1 o 2). Las sondas de ácido nucleico deben ser
diferentes de las utilizadas en el Análisis de Detección Molecular 2 para E. coli O157 (incluido H7) 3M.
Opción 4: mediante el uso de cualquier otro método certificado NF VALIDATION, cuyo principio debe ser diferente al
Análisis de Detección Molecular 2 para E. coli O157 (incluido H7) 3M. Se debe utilizar el protocolo completo descrito
para este segundo método validado. Todos los pasos previos al comienzo de la confirmación deben ser comunes para
ambos métodos.
En caso de resultados discordantes (presuntamente positivos con el método alternativo, no confirmados por alguno
de los medios descritos anteriormente), el laboratorio debe seguir los pasos necesarios para garantizar la validez
del resultado obtenido.
Si tiene preguntas acerca de los procedimientos o las aplicaciones específicas, visite nuestro sitio web en
www.3M.com/foodsafety o comuníquese con su representante o distribuidor local de 3M.
Apéndice A. Interrupción por protocolo: Almacenamiento y nuevo análisis de las muestras
1. Para almacenar un lisado tratado con calor, vuelva a tapar el tubo de lisis con una tapa limpia (consulte Lisis,
sección 4.5).
2. Para almacenar una muestra enriquecida, incube durante 18 horas como mínimo antes de almacenar.
3. Almacene entre 4 °C y 8 °C por hasta 72 horas.
4. Prepare una muestra almacenada para amplificación invirtiéndola 2 a 3 veces para mezclar.
5. Destape los tubos.
6. Coloque los tubos de lisado mezclados en el Bloque de Calor para el Sistema de Detección Molecular 3M y caliéntelos
a 100 °C ± 1 °C durante 5 ± 1 minutos.
7. Retire la gradilla de tubos Solución de Lisis 3M del bloque de calentamiento y deje que se enfríe en el Bloque de Frío
para el Sistema de Detección Molecular 3M al menos durante 5 minutos y por un máximo de 10 minutos.
8. Siga el protocolo en la sección Amplificación que se detalla arriba.
Referencias:
1. US Food and Drug Administration Bacteriological Analytical Manual. Chapter 4A: Diarrheagenic Escherichia coli.
November 2015.
2. US Department of Agriculture (USDA) FSIS Microbiology Laboratory Guidebook 5.09. Detection, Isolation and
Identification of Escherichia coli O157:H7 from Meat Products and Carcass and Environmental Sponges. Effective Date:
15 January 2015.
3. ISO 16654:2001 Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection of Escherichia
coli O157.
4. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General rules for microbiological examination.
6. ISO 6887. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension and decimal
dilutions for microbiological examination.
7. Installation Qualification (IQ)/Operational Qualification (OQ) 3M
Explicación de los símbolos
www.3M.com/foodsafety/symbols
Molecular Detection System. 3M Food Safety.
TM
10
(Español)
ES
, realizado sobre
(5)