3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 211

Lisis
1. Panaskan tabung Larutan Lisis 3M dengan cara menyetel rak pada suhu ruangan (20-25°C) selama satu malam
(16-18 jam). Cara lain yang dapat digunakan untuk menyeimbangkan tabung Larutan Lisis 3M pada suhu kamar adalah
dengan meletakkan tabung Larutan Lisis 3M di meja laboratorium sedikitnya selama 2 jam, inkubasi tabung Larutan
Lisis 3M dalam inkubator 37 ± 1°C selama 1 jam, atau meletakkannya di dalam pemanas blok ganda kering selama
30 detik pada suhu 100°C.
2. Balikkan tabung dalam kondisi tertutup agar isinya tercampur. Lanjutkan ke langkah berikutnya dalam waktu 4 jam.
3. Buang larutan/media cair pengayaan dari inkubator.
4. Satu tabung Larutan Lisis 3M dibutuhkan untuk setiap sampel dan sampel Kontrol Negatif (NC) (media pengayaan steril).
4.1 Strip tabung Larutan Lisis 3M dapat dipotong sesuai jumlah tabung Larutan Lisis 3M yang diinginkan. Pilih jumlah
tabung Larutan Lisis 3M atau strip 8 tabung yang diperlukan. Letakkan tabung Larutan Lisis 3M pada rak kosong.
4.2 Untuk mencegah kontaminasi silang, buka tutup satu strip tabung Larutan Lisis 3M satu per satu dan gunakan
ujung pipet baru untuk setiap tahap pemindahan.
4.3 Pindahkan sampel yang diperkaya ke tabung Larutan Lisis 3M sesuai petunjuk di bawah ini:
Pindahkan setiap sampel yang diperkaya ke tabung Larutan Lisis 3M tersendiri terlebih dulu. NC dipindahkan
paling akhir.
4.4 Gunakan Alat Penutup/Pembuka Deteksi Molekuler 3M™- Lisis untuk membuka strip tabung Larutan Lisis 3M satu
per satu.
4.5 Buang penutup tabung Larutan Lisis 3M – Jika lisat akan disimpan untuk pengujian ulang, simpan penutup
di dalam wadah bersih untuk digunakan kembali setelah lisis.
4.5.1 Untuk memproses lisat yang disimpan, lihat Apendiks A.
4.6 Pindahkan 20 µL sampel ke dalam tabung Larutan Lisis 3M, kecuali jika disebutkan lain dalam Tabel
Protokol 2, 3, dan 4.
5. Ulangi langkah 4.3 hingga setiap sampel telah ditambahkan ke dalam tabung Larutan Lisis 3M yang sesuai dalam strip.
6. Ulangi langkah 4.1 hingga 4.6 sesuai keperluan, sesuai jumlah sampel yang akan diuji.
7. Setelah selesai memindahkan semua sampel, pindahkan 20 µL NC (media pengayaan steril, contohnya BPW ISO)
ke dalam tabung Larutan Lisis 3M. Jangan gunakan air sebagai NC.
8. Pastikan bahwa suhu Sisipan Blok Pemanas Deteksi Molekuler 3M berada pada 100 ± 1°C.
9. Letakkan rak tidak tertutup berisi tabung Larutan Lisis 3M di dalam Sisipan Blok Pemanas Deteksi Molekuler 3M lalu
panaskan selama 15 ± 1 menit. Selama pemanasan, larutan Lisis 3M akan mengalami perubahan warna dari merah muda
(dingin) menjadi kuning (panas).
Sampel yang belum dipanaskan dengan benar selama tahap pengujian lisis dapat dianggap sebagai potensi bahaya
biologis dan TIDAK boleh dimasukkan ke dalam Instrumen Deteksi Molekuler 3M.
10. Keluarkan rak tidak tertutup berisi tabung Larutan Lisis 3M dari blok pemanasan dan biarkan hingga dingin dalam
Sisipan Blok Pendingin Deteksi Molekuler 3M selama 5 sampai 10 menit. Sisipan Blok Pendingin Deteksi Molekuler
3M, yang digunakan pada suhu ruangan tanpa Baki Blok Pendingin Deteksi Molekuler 3M, harus diletakkan langsung di
meja laboratorium. Ketika dingin, larutan lisis akan kembali berwarna merah muda.
(Bahasa Indonesia)
ID
7
20 µl