3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 85

BEMÆRK: Selv en negativ prøve vil ikke give en nulaflæsning, idet systemet og 3M Molekylær Detektions Analyse
2 - E. coli O157 (inklusiv H7) amplifikationsreagenser har en "baggrundsmæssig" aflæsning for relativ lysenhed (RLU).
I sjældne tilfælde af en usædvanlig lyseffekt vil algoritmemærkaterne kategorisere dette som Inspektion. 3M anbefaler
brugeren at gentage analysen for alle inspektionsprøver. Hvis resultatet fortsat markeres til Inspektion, skal du fortsætte til
bekræftelsestest ved brug af din foretrukne metode eller som specificeret i lokale forskrifter.
I tilfælde af uoverensstemmende resultater (formodede positive med 3M Molekylær Detektions Analyse 2 - E. coli O157
(inklusiv H7), som ikke er bekræftet med en af metoderne beskrevet ovenfor, og især for latexagglutineringstesten), skal
laboratoriet anvende den nødvendige procedure for at sikre valideringen af de opnåede resultater.
Bekræftelse af resultater ifølge NF VALIDATION-certificeret metode
Inden for rammerne af NF VALIDATION skal alle prøver, der er identificeret som positive med 3M Molekylær Detektions
Analyse 2 - E. coli O157 (inklusiv H7), bekræftes med en af følgende test:
Mulighed 1: Brug af ISO 16654
Mulighed 2: Implementering af en bekræftelsesmetode bestående af følgende: Stryg 50 μl af opformeringen med bufferet
peptonvand på en Cefixime Potassium Tellurite Sorbitol MacConkey (CT-SMAC)
(3)
ved 37°C. Stryg karakteristiske kolonier på næringsagar, og udfør en latexagglutineringstest direkte på de isolerede
kolonier. Hvis resultaterne af 3M Molekylær Detektions Analyse 2 - E. coli O157 (inklusiv H7) ikke bekræftes, udføres
et immunmagnetisk trin, hvorefter der stryges 50 μl på CT-SMAC.
Mulighed 3: Brug af nukleinsyreprober som beskrevet i EN ISO 7218
(renset eller urenset) fra CT-SMAC (se mulighed 1 eller 2). Nukleinsyreproberne skal være forskellige fra dem, der anvendes
i 3M Molekylær Detektions Analyse 2 - E. coli O157 (inklusiv H7).
Mulighed 4: Brug af en anden NF VALIDATION-certificeret metode med et andet princip end 3M Molekylær Detektions
Analyse 2 - E. coli O157 (inklusiv H7). Den komplette protokol, der er beskrevet for denne anden validerede metode, skal
anvendes. Alle trin før bekræftelsen startes skal være fælles for begge metoder.
I tilfælde af uoverensstemmende resultater (formodede positive med den alternative metode, som ikke er bekræftet med
en af metoderne beskrevet ovenfor), skal laboratoriet anvende den nødvendige procedure for at sikre valideringen af det
opnåede resultat.
Hvis du har spørgsmål til specifikke anvendelser eller procedurer, bedes du besøge vores websted på
www.3M.com/foodsafety eller kontakte din lokale 3M-repræsentant eller -distributør.
Bilag A. Protokolafbrydelse: Opbevaring og gentagelse af prøven
1. Til opbevaring af varmebehandlet lysat påsættes en ren hætte på lysisreagensglasset (se afsnit 4.5 Lysinbehandling).
2. Hvis en opformeret prøve skal opbevares, skal den inkuberes i minimum 18 timer før opbevaring.
3. Opbevar ved 4-8°C i op til 72 timer.
4. Forbered en opbevaret prøve til amplifikation ved at vende den på hovedet 2-3 gange for at blande.
5. Tag lågene af reagensglassene.
6. Placer de blandede lysatreagensglas på 3M Molekylær Detektions Varmeblok Indlæg, og varm op til
100 ± 1°C i 5 ± 1 minutter.
7. Fjern holderen med 3M LS-reagensglas fra varmeblokken, og lad den køle i 3M Molekylær Detektions Køleblok Indlæg
i mindst 5 minutter og i højst 10 minutter.
8. Fortsæt protokollen i afsnittet Amplifikation som angivet ovenfor.
-standarden fra opformeringen med bufferet peptonvand
(3)
agarplade. Inkuber i 24 ± 3 timer
(3)
-standarden udført på isolerede kolonier
(5)
9
(Dansk)
DA
.
(3)