3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 64

8. Klik op de startknop van de software en selecteer het te gebruiken instrument. Het deksel van het geselecteerde
instrument wordt automatisch geopend.
9. Plaats de 3M Moleculaire Detectie - Speed Loader Tray in het 3M Moleculaire Detectieinstrument en sluit het deksel
om de analyse te beginnen. De resultaten zijn binnen 60 minuten beschikbaar, maar positieve resultaten kunnen sneller
worden gedetecteerd.
10. Nadat de test is afgerond, haalt u de 3M Moleculaire Detectie - Speed Loader Tray uit het 3M Moleculaire
Detectieinstrument en verwijdert u de buisjes door ze eerst gedurende 1 uur in een bleekmiddeloplossing van
1-5% (volumeconcentratie in water) te dompelen, uit de buurt van de testbereidingsruimte.
OPMERKING: Om het risico op vals positieve resultaten door kruisbesmetting te beperken, mag u nooit
reagensbuisjes met geamplificeerd DNA openen. Dit geldt ook voor de 3M Reagenscontrole, 3M Moleculaire
Detectieanalyse 2 - E. coli O157 (inclusief H7)-reagensbuisjes en buisjes voor 3M Matrixcontrole. Verwijder
verzegelde reagensbuisjes door ze gedurende 1 uur in een bleekmiddeloplossing van 1-5% (volumeconcentratie
in water) te dompelen, uit de buurt van de testbereidingsruimte.
Resultaten en interpretatie
Een algoritme interpreteert de lichtuitvoercurve die het resultaat is van de nucleïnezuuramplificatie. De software analyseert
de resultaten automatisch en deze worden op basis van het resultaat met een kleurencode aangegeven. Een positief of
negatief resultaat wordt bepaald door de analyse van een aantal unieke curveparameters. Vermoedelijk positieve resultaten
worden onmiddellijk gerapporteerd, terwijl de negatieve- en inspectieresultaten pas na de afronding van de analyse
worden weergegeven.
Vermoedelijk positieve monsters moeten worden bevestigd aan de hand van de standaard werkmethoden van het
laboratorium of door de gepaste methode voor bevestiging te volgen
BPW ISO-verrijking naar secundaire verrijkingsbouillons, gevolgd door een lagenkweek en verificatie van isolaten met
gebruik van toepasselijke biochemische en serologische methoden.
OPMERKING: Zelfs een negatief monster heeft geen nulresultaat tot gevolg, want het systeem en de 3M Moleculaire
Detectieanalyse 2 - E. coli O157 (inclusief H7)-amplificatiereagentia geven een achtergrond-relatief resultaat met
betrekking tot Relative Light Units (RLU).
In het onwaarschijnlijke geval van ongebruikelijke lichtuitvoer definieert het algoritme dit als 'Inspecteren.' 3M beveelt de
gebruiker aan om de test voor de te inspecteren monsters opnieuw uit te voeren. Als het resultaat nog steeds 'Inspecteren'
is, voert u een bevestigingstest uit aan de hand van uw voorkeursmethode of volgens de lokale wet- en regelgeving.
In geval van tegenstrijdige resultaten (vermoedelijk positieve resultaten met de 3M Moleculaire Detectieanalyse 2 - E. coli
O157 (inclusief H7), die niet zijn geverifieerd met een van de hierboven beschreven methoden en in het bijzonder voor
de latexagglutinatietest), moet het laboratorium de nodige stappen nemen om de validiteit van de verkregen resultaten
te garanderen.
Verificatie van resultaten conform de met NF VALIDATION gecertificeerde methode
In het kader van de NF VALIDATION moeten alle monsters die door de 3M Moleculaire Detectieanalyse 2 - E. coli O157
(inclusief H7) als positief worden aangemerkt, met een van de onderstaande tests worden bevestigd:
Optie 1: Maak gebruik van de ISO-norm 16654
Optie 2: Implementeer een bevestigingsmethode die bestaat uit de volgende stappen: Verdeel 50 μl gebufferde
peptonwaterverrijking over een Cefixime Potassium Tellurite Sorbitol MacConkey (CT-SMAC)
(3)
gedurende 24 ± 3 uur op 37 °C. Verdeel de karakteristieke kolonies over de voedingsagar en voer een agglutinatietest
rechtstreeks op geïsoleerde kolonies uit. Als de resultaten van de 3M Moleculaire Detectieanalyse 2 - E. coli O157
(inclusief H7) niet worden bevestigd, voert u een immunomagnetische scheidingstap uit en verdeelt u 50 μl over
CT-SMAC.
Optie 3: Maak gebruik van nucleïnezuursondes zoals beschreven in de EN ISO-norm 7218
kolonies (gezuiverd of niet) vanaf CT-SMAC (zie optie 1 of 2). De nucleïnezuursondes moeten andere zijn dan de sondes
die in de 3M Moleculaire Detectieanalyse 2 - E. coli O157 (inclusief H7) worden gebruikt.
Optie 4: Maak gebruik van een andere met NF VALIDATION gecertificeerde methode, waarvan het principe moet
verschillen van de 3M Moleculaire Detectieanalyse 2 - E. coli O157 (inclusief H7). Het hele protocol van deze tweede
gevalideerde methode moet nauwkeurig worden gevolgd. Alle stappen voorafgaand aan de bevestiging moeten voor beide
procedures hetzelfde zijn.
In geval van tegenstrijdige resultaten (vermoedelijk positief met de alternatieve methode, niet geverifieerd met een van
de hierboven beschreven methoden), moet het laboratorium de noodzakelijke stappen nemen om de validiteit van het
verkregen resultaat te garanderen.
Als u vragen hebt over specifieke toepassingen of procedures, kunt u onze website www.3M.com/foodsafety bezoeken
of contact opnemen met uw plaatselijke vertegenwoordiger of distributeur van 3M.
, te beginnen met de overdracht van de primaire
(1,2,3)
en begin met de gebufferde peptonwaterverrijking
(3)
9
(Nederlands)
NL
.
(3)
-agarplaat. Incubeer
(3)
, uitgevoerd op geïsoleerde
(5)