3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 62

Lyse
1. Laat de buisjes met 3M Lyse-oplossing opwarmen door het rek gedurende 16-18 uur op kamertemperatuur (20-25 °C)
te plaatsen. U kunt de buisjes met 3M Lyse-oplossing eveneens op kamertemperatuur brengen door de buisjes ten
minste 2 uur lang op de laboratoriumtafel te plaatsen, de buisjes 1 uur lang op een temperatuur van 37 ± 1 °C in een
incubator te incuberen of ze 30 seconden lang op een temperatuur van 100 °C in een droge dubbelblokverhitter
te plaatsen.
2. Keer de buisjes met dop om om ze te mengen. Ga binnen 4 uur verder met de volgende stap.
3. Haal de verrijkingsbouillon uit de incubator.
4. Er is een buisje met 3M Lyse-oplossing vereist voor elk monster, evenals het negatieve controle-monster
(NC; steriel verrijkingsmedium).
4.1 Stroken met buisjes met 3M Lyse-oplossing kunnen worden afgesneden tot het gewenste aantal buisjes met
3M Lyse-oplossing. Selecteer het benodigde aantal individuele buisjes met 3M Lyse-oplossing of stroken met
8 buisjes. Plaats de buisjes met 3M Lyse-oplossing in een leeg rek.
4.2 Haal de stroken van de buisjes met 3M Lyse-oplossing één voor één uit de verpakking en gebruik een nieuwe
pipettip voor elke overdrachtsstap om zo kruisbesmetting te voorkomen.
4.3 Breng het verrijkte monster over naar de buisjes met 3M Lyse-oplossing zoals hieronder beschreven:
Breng als eerste het verrijkt monster over naar individueel buisje met 3M Lyse-oplossing. Breng de NC
als laatste over.
4.4 Gebruik de lyse van het 3M™ Moleculaire Detectie Cap/Decap gereedschap - Lyse om één voor één een strook
buisjes met 3M Lyse-oplossing open te maken.
4.5 Gooi de dop van het buisje met 3M Lyse-oplossing weg – als er lysaat voor een hertest wordt bewaard, dienen
de doppen in een schone bak te worden geplaatst om deze na de lyse opnieuw aan te brengen.
4.5.1 Zie Appendix A voor de verwerking van bewaard lysaat.
4.6 Breng 20 µl monster over in een buisje met 3M Lyse-oplossing, tenzij in de protocoltabellen 2, 3 en 4 anders wordt
aangegeven.
5. Herhaal stap 4.3 totdat elk individueel monster is toegevoegd aan het bijhorende buisje met 3M Lyse-oplossing
in de strook.
6. Herhaal, indien nodig, stappen 4.1 tot 4.6 voor alle monsters die worden getest.
7. Wanneer alle monsters overgebracht zijn, brengt u 20 µl NC (steriel verrijkingsmedium, zoals BPW ISO) over naar een
buisje met 3M Lyse-oplossing. Gebruik geen water als NC.
8. Controleer of de temperatuur van het 3M Moleculaire Detectie - Verwarmingsblokinzetstuk zich op 100 ± 1 °C bevindt.
9. Plaats het onbedekte rek met buisjes met 3M Lyse-oplossing in het 3M Moleculaire Detectie -
Verwarmingsblokinzetstuk en verwarm gedurende 15 ± 1 minuten. Tijdens de verwarming verandert de 3M Lyse-
oplossing van roze (koel) naar geel (heet).
Monsters die tijdens de lyseanalysestap niet de juiste warmtebehandeling hebben ondergaan, kunnen als een potentieel
biologisch gevaar worden beschouwd en mogen NIET in het 3M Moleculaire Detectieinstrument worden geplaatst.
10. Haal het onbedekte rek met buisjes met 3M Lyse-oplossing uit het verwarmingsblok en laat het minimaal 5 minuten
en maximaal 10 minuten afkoelen in het 3M Moleculaire Detectie - Koelblokinzetstuk. Het 3M Moleculaire Detectie -
Koelblokinzetstuk wordt zonder de 3M Moleculaire Detectie - Lade voor koelblok op omgevingstemperatuur gebruikt
en moet rechtstreeks op de laboratoriumtafel geplaatst zijn. Zodra de lyse-oplossing koel is, krijgt deze een roze kleur.
NL
7
(Nederlands)
20 µl