3M E. coli O157 Gebrauchsanweisungen Seite 51

Lisis
1. Permita que los tubos de Solución de Lisis 3M se calienten colocando la gradilla a temperatura ambiente (20 °C-25 °C)
durante la noche (16-18 horas). Las alternativas para que los tubos de Solución de Lisis 3M alcancen temperatura
ambiente son colocar los tubos de Solución de Lisis 3M sobre la mesa de laboratorio durante por lo menos 2 horas,
incubar los tubos de Solución de Lisis 3M en una incubadora a 37 °C ± 1 °C durante 1 hora o colocarlos en una unidad
de calentamiento de dos bloques seca durante 30 segundos a 100 °C.
2. Invierta los tubos tapados para mezclarlos. Proceda con el paso siguiente dentro de 4 horas.
3. Retire el caldo de enriquecimiento de la incubadora.
4. Se requiere un tubo de Solución de Lisis 3M para cada muestra y la muestra de control negativo (NC)
(medio de enriquecimiento estéril).
4.1 Las tiras de tubos de Solución de Lisis 3M pueden cortarse para obtener la cantidad deseada de tubos de la
Solución de Lisis 3M. Seleccione la cantidad de tubos de Solución de Lisis 3M individuales o tiras de 8 tubos
necesarias. Coloque los tubos de Solución de Lisis 3M en una gradilla vacía.
4.2 Para evitar la contaminación cruzada, destape una tira de tubo de Solución de Lisis 3M por vez y use una nueva
punta de pipeta para cada paso de transferencia.
4.3 Transfiera la muestra enriquecida a los tubos de Solución de Lisis 3M como se describe a continuación:
Transfiera cada muestra enriquecida a un tubo de Solución de Lisis 3M individual primero. Transfiera el NC
al final.
4.4 Utilice la Herramienta para Encapuchado/Desencapuchado del Sistema de Detección Molecular – Lisis
3M™ para destapar una tira de tubos de Solución de Lisis 3M, una tira por vez.
4.5 Deseche la tapa del tubo de Solución de Lisis 3M; si se conservara el lisado para una repetición de prueba,
coloque las tapas en un envase limpio para su reaplicación luego de la lisis.
4.5.1 Para ver cómo procesar el lisado conservado, consulte el Apéndice A.
4.6 Transfiera 20 µl de la muestra a un tubo de Solución de Lisis 3M, a menos que se indique lo contrario en las Tablas
2, 3 y 4 del protocolo.
5. Repita el paso 4.3 hasta que cada muestra individual se haya agregado al correspondiente tubo de Solución de Lisis 3M
de la tira.
6. Repita los pasos 4.1 a 4.6 según sea necesario para la cantidad de muestras que se deben analizar.
7. Cuando se hayan transferido todas las muestras, transfiera 20 µL del NC (medio de enriquecimiento estéril,
por ejemplo, BPW ISO) a un tubo de Solución de Lisis 3M. No use agua como un NC.
8. Verifique que la temperatura del Bloque de Calor para el Sistema de Detección Molecular 3M sea de 100 °C ± 1 °C.
9. Coloque la gradilla descubierta de tubos de Solución de Lisis 3M en el Bloque de Calor para el Sistema de Detección
Molecular 3M y caliente durante 15 ± 1 minutos. Durante el calentamiento, la Solución de Lisis 3M cambiará de rosado
(frío) a amarillo (caliente).
Las muestras que no se hayan tratado debidamente con calor durante el paso de lisis del ensayo pueden considerarse
un posible riesgo biológico y NO deben introducirse en el Equipo de Detección Molecular 3M.
10. Retire la gradilla descubierta de tubos Solución de Lisis 3M del bloque de calentamiento y deje que se enfríe en la
Inserción del Bloque de Frío para el Sistema de Detección Molecular 3M al menos durante 5 minutos y por un máximo
de 10 minutos. Cuando se usa el Bloque de Enfriamiento Molecular 3M a temperatura ambiente sin la Bandeja para el
Bloque de Frío del Sistema de Detección Molecular 3M, debe colocarse directamente sobre la mesa del laboratorio.
Cuando esté fría, la solución de lisis se revertirá a un color rosado.
7
(Español)
ES
20 µl