Hämoglobinbestimmung; Übersicht; Vorgang Der Hämoglobinbestimmung - Abbott Cell-Dyn 3500 System Bedienungsanleitung

Kapitel 3
Übersicht
Vorgang der Hämoglobinbestimmung
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CELL-DYN 3500 Bedienungsanleitung
56-7502/R6 — Februar 2007
Der HGB-Kanal dient zur kolorimetrischen Hämoglobinbestimmung.
Die Blutprobe wird zunächst im Verhältnis 1 : 301 mit Verdünnungs-
mittel und WIC-/HGB-Lyse-Reagenz in der Mischkammer des
WIC-Transducers verdünnt. Diese Verdünnung wird für die
WIC-Zählung und die HGB-Messung verwendet. Die HGB-Konzen-
tration wird traditionell mit einer modifizierten Hämoglobincyanid-
methode gemessen. Um dem Anspruch einer gesunden, umwelt-
bewußten Arbeitsatmosphäre gerecht zu werden, kann im
CELL-DYN 3500 System auch ein Cyanid-freies Reagenz verwendet
werden. Dieses Reagenz wandelt Hämoglobin in einen Hämoglobin-
hydroxylaminkomplex um. Als Lichtquelle dient eine LED mit einem
nachgeschalteten Filter von 540 nm. Das Durchlicht wird von einem
Photodetektor gemessen.
Das WIC-/HGB-Lyse-Reagenz hämolysiert die verdünnten Erythro-
zyten und wandelt das freigesetzte Hämoglobin in ein stabiles
Chromagen um. Nach Abschluß der WIC-Zählung wird die Probe in
die Hämoglobin-Durchflußküvette überführt, wo die Bestimmung der
Hämoglobinkonzentration erfolgt. Die Probe passiert die Küvette von
unten nach oben. Luftblasen können auf diese Weise nach oben steigen
und beeinflussen dadurch nicht das Meßergebnis.
Das von der LED abgegebene Licht passiert die Durchflußküvette und
ein 540-nm-Filter, bevor es auf den Photodetektor trifft. Die
Hämoglobinkonzentration ist der Absorption der Probe bei 540 nm
direkt proportional. An jeder Probe werden fünf separate Hämoglobin-
bestimmungen vorgenommen. Der endgültige HGB-Wert ist der
Mittelwert aus drei Messungen, wobei der höchste und der niedrigste
Wert unberücksichtigt bleiben. Nach der Hämoglobinbestimmung
wird die HGB-Durchflußküvette mit Detergens gespült.
Das Detergens wird entsorgt und frisches Detergens in die Durchfluß-
küvette geleitet. Am Detergens wird eine Leerwertmessung durchge-
führt, die für das von der Probe erhaltene Signal als Referenz dient. Für
jede Probe werden fünf Leerwertmessungen vorgenommen. Die
HGB-Referenzmessung ist der Mittelwert aus drei Messungen, wobei
der höchste und der niedrigste Wert unberücksichtigt bleiben.
Zur Bestimmung der HGB-Konzentration der Probe werden die
Referenz- und Probenmessungen miteinander verglichen. Das
HGB-Ergebnis wird in Gramm Hämoglobin pro Deziliter Vollblut
angegeben. Hämoglobinergebnisse unter 10 g/dl können mit bis zu
zwei Dezimalstellen angezeigt werden.
Allgemeine Systemfunktionen
Hämoglobinbestimmung
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