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Axio Imager
4.9.11
Auflicht - Fluoreszenz einstellen
ACHTUNG
Zur Änderung der Transmission ist ein FL-Abschwächer diskret (423616-0000-000 oder
423617-0000-000) einzusetzen. Graufilter in den Filterrädern 2x (428300-0000-000 bzw.
428301-0000-000) sind auf Dauer nicht beständig.
(1)
Allgemeines Wirkprinzip
Die Auflicht-Fluoreszenzmethode ermöglicht es, fluoreszierende Substanzen kontrastreich in typischen
Fluoreszenzfarben darzustellen. Im Auflicht-Fluoreszenzmikroskop gelangt das von einer leistungsfähigen
Leuchte erzeugte Licht über ein Wärmeschutzfilter auf das Anregungsfilter (Bandpass). Die gefilterte
kurzwellige Anregungsstrahlung wird von einem dichromatischen Strahlenteiler reflektiert und über das
Objektiv auf das Präparat fokussiert. Das Präparat absorbiert die kurzwellige Strahlung und emittiert an-
schließend längerwellige Fluoreszenzstrahlung (Stoke'sches Gesetz), die nun abbildungsseitig vom Objek-
tiv erfasst und vom dichromatischen Strahlenteiler durchgelassen wird. Schließlich passieren die Strahlen
ein Sperrfilter (Langpass/Bandpass), welches nur die vom Präparat emittierte langwellige Strahlung
passieren lässt.
Anregungs- und Sperrfilter müssen spektral sehr genau aufeinander abgestimmt sein und befinden sich
gemeinsam mit dem zugehörigen dichromatischen Strahlenteiler in einem Reflektormodul FL P&C.
(2)
Geräteausrüstung
− Empfehlenswerte Objektive EC Plan-Neofluar oder Fluar (UV-Anregung)
− Reflektormodul FL P&C im Reflektorrevolver
− Quecksilberdampf-Kurzbogenleuchte HBO 100 für Auflichtbeleuchtung
− Halogenleuchte HAL 100 für Durchlichtbeleuchtung
Die Quecksilberdampf-Kurzbogenleuchte muss vor Anwendung des Auflicht-Fluoreszenzverfah-
rens unbedingt gemäß Abschnitt 3.23.3 unter Verwendung der Justierhilfe justiert worden sein.
Gegebenenfalls muss in Abhängigkeit von der Betriebsdauer nachjustiert werden.
(3)
Auflicht - Fluoreszenz einstellen
Die erste Auflicht-Fluoreszenz-Einstellung wird wesentlich erleichtert, wenn mit dem Objektiv EC-Plan-
Neofluar 20x/0,50 und einem stark fluoreszierenden Präparat begonnen wird. Es können auch zunächst
Demonstrationspräparate verwendet werden.
Falls vom Durchlicht-DIC-Verfahren sich noch der Kompensator λ (4-60/7) im Einschub oberhalb
des Objektivrevolvers befindet, ist dieser dort vor Einstellung der Auflicht-Fluoreszenz her-
auszunehmen.
• Halogenleuchte HAL100 einschalten.
• Objektiv EC-Plan-Neofluar 20x/0,50 einschalten.
• Kondensorrevolver zunächst auf Position H Hellfeld (oder auch Phasenkontrast Ph) stellen und die zu
untersuchende Präparatstelle aufsuchen.
• Lichtweg im Auflichtilluminator mit Auflicht-Shutter RL (rechts hinten am Stativ) vorerst noch versperrt
halten (Kontroll-LED leuchtet).
B 46-0078 d 12/05
BEDIENUNG
Beleuchtungs- und Kontrastverfahren
Carl Zeiss
141
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