Inhaltsverzeichnis
Werbung
VERFAHRENSPRINZIP
Der hc2 High-Risk-HPV-DNA-Test unter Verwendung der Hybrid Capture 2-Technologie ist ein
Nukleinsäure-Hybridisierungsassay mit Signalverstärkung, der sich den Mikrotiterplatten-
Chemilumineszenznachweis zunutze macht. Die in den Proben enthaltene Ziel-DNA hybridisiert mit einer
spezifischen HPV-RNA-Sonde. Die sich ergebenden RNA:DNA-Hybride werden an die Oberfläche einer
mit für RNA:DNA-Hybriden spezifischen Antikörpern beschichteten Mikrotiterplatten-Vertiefung fixiert
(capturing). Immobilisierte Hybride werden dann mit alkalischer Phosphatase-konjugierten Antikörpern,
die für die RNA:DNA-Hybride spezifisch sind, zur Reaktion gebracht und mit einem Chemilumineszenz-
Substrat nachgewiesen. An jeden Antikörper werden mehrere alkalische Phosphatasemoleküle
konjugiert. Mehrfach konjugierte Antikörper binden an jedes fixierte (captured) Hybrid, was zu einer
erheblichen Signalverstärkung führt. Wird das Substrat durch die gebundene alkalische Phosphatase
gespalten, erfolgt die Abgabe von Licht, die als relative Lumineszenzeinheiten (RLU) an einem
Luminometer gemessen wird. Die Intensität des abgegebenen Lichts zeigt die An- oder Abwesenheit von
Ziel-DNA in der Probe an.
Eine RLU-Messung, die gleich oder größer als der Grenzwert ist, zeigt das Vorliegen von High-Risk-HPV-
DNA-Sequenzen in der Probe an. Eine unter dem Grenzwert liegende RLU-Messung weist auf die
Abwesenheit der getesteten spezifischen High-Risk-HPV-DNA-Sequenzen oder HPV-DNA-
Konzentrationen unter der Nachweisgrenze des Assays hin.
Tests mit großem Probendurchsatz mittels des hc2 HPV-DNA-Tests können unter Verwendung des
®
Rapid Capture
Systems (RCS) durchgeführt werden. Dieses Instrument verarbeitet bis zu 352 Proben in
acht Stunden. Damit Tests mit großem Probedurchsatz getätigt werden können, werden alle
Verfahrensschritte des Assays vom RCS übernommen, mit Ausnahme von Probendenaturierung,
Chemilumineszenzsignalnachweis und Ausgabe der Ergebnisse.
3
Werbung
Inhaltsverzeichnis
