3M MDA2LMO96 Bedienungsanleitung Seite 85

OBSERVERA: För att minimera risken för falskt positiva resultat på grund av korskontaminering ska reagensrör med
amplifierad DNA aldrig öppnas. Detta innefattar rör med reagenskontroll, reagens och Matris Kontroll. Kassera alltid de
förslutna reagensrören genom att blötlägga dem i en 1−5 % (volym i vatten) blekmedelslösning i 1 timme på avstånd från
analysberedningsområdet.
Resultat och tolkning
En algoritm tolkar ljusutstrålningskurvan som genereras genom detektion av nukleinsyreamplifiering. Resultaten analyseras
automatiskt av programmet och färgkodas baserat på resultatet. Ett positivt eller negativt resultat fastställs genom analys
av ett antal unika kurvparametrar. Presumtivt positiva resultat rapporteras i realtid medan negativa och Inspektera-resultat
visas när körningen har slutförts.
Presumtivt positiva prover ska bekräftas i enlighet med laboratoriets standardrutiner för detta eller genom att följa lämplig
referensmetod för bekräftelse
anrikningsbuljongen (om tillämpligt), följt av efterföljande applicering på platta och bekräftelse av isolater med hjälp av
lämpliga biokemiska och serologiska metoder.
I NF-valideringssammanhang måste alla prov som identifieras som positiva av 3M Molecular Detection Assay 2 - Listeria
monocytogenes bekräftas av en av följande tester:
Alternativ 1: Genom att använda standarden ISO 11290
Alternativ 2: Genom att använda en bekräftelsemetod som består av följande: Överföring av 0,1 ml av Halv Fraser-buljongen.
Stryk direkt på Ottaviani Agosti-agar såsom beskrivs i ISO 11290
Alternativ 3: Genom att använda syreprober, såsom beskrivs i standarden EN ISO 7218
vald agar (se Alternativ 1 eller 2).
Alternativ 4: Genom att använda någon annan certifierad NF-valideringsmetod där principen måste skilja sig från den i
3M Molecular Detection Assay 2 - Listeria monocytogenes. Det kompletta protokollet som beskrivs för den här sekundära
metoden måste användas. Alla steg innan bekräftelsestart måste vara gemensamma för båda metoderna.
Om det blir ett avvikande resultat (presumtiva positiva med den alternativa metoden, icke-bekräftat av en av de metoder
som beskrivs ovan) måste laboratoriet följa de åtgärder som krävs för att säkerställa giltigheten av det uppnådda resultatet.
OBS! Inte ens ett negativt prov ger ett nollvärde, eftersom 3M Molecular Detection Assay 2 - Listeria monocytogenes
och amplifieringsreagenserna i systemet har en relativ ljusenhet (RLU) som "bakgrund".
I de sällsynta fall då ovanlig ljusstrålning förekommer betecknar algoritmen detta som "Inspektera". 3M rekommenderar att
användaren upprepar analysen av prover som resulterar i Inspektera. Om resultatet fortsätter att vara Inspektera ska du gå
vidare till bekräftelsetestet och använda metoden du föredrar eller den som anges i lokala föreskrifter.
Bilaga A. Protokollavbrott: Förvaring och omprovning av värmebehandlade lysater.
1. Om värmebehandlade lysater behöver förvaras ska lyseringsröret tillslutas med ett rent lock (se "Lysering", 4.5)
2. Förvara i 4 till 8 °C i upp till 72 timmar.
3. Förbered ett prov som har förvarats för amplifiering genom att vända det upp och ned 2–3 gånger så att det blandas.
4. Ta bort locken från rören.
5. Placera de omblandade lysatprovrören i 3M Molekylär Detektion, Insats för Värmeblock och värm vid 100 ±1 °C i 5 ±1
minuter.
6. Ta bort de icke övertäckta ställen med LL-provrör från uppvärmningsblocket och låt det svalna i 3M Molekylär
Detektion, Insats för kylblock i åtminstone 5 minuter och maximalt 10 minuter.
7. Fortsätt protokollet från avsnittet "Amplifiering" som beskrivs ovan.
Om du har frågor rörande specifika tillämpningar eller metoder kan du besöka vår webbplats på www.3M.com/foodsafety
eller kontakta din lokala 3M-representant eller -leverantör.
, som börjar med överföring av den primära anrikningsbuljongen till den sekundära
(1, 2, 3)
(3)
och börja med Halv Fraser-anrikning
.
(3)
10
(Svenska)
SV
, utförs på isolerade kolonier, från
(5)