3M MDA2LMO96 Bedienungsanleitung Seite 73

KENNISGEVING: Om het risico op valse positieve resultaten door kruisbesmetting te beperken, mag u nooit de
reagensbuisjes met geamplificeerd DNA openen. Dit geldt ook voor de buisjes voor Reagenscontrole, Reagens en Matrix
controle. Gooi verzegelde reagensbuisjes weg door ze eerst gedurende 1 uur, op een plaats die ver verwijderd is van het
testgebied, in een bleekmiddeloplossing van 1-5% (volumeconcentratie in water) te dompelen.
Resultaten en interpretatie
Een algoritme interpreteert de lichtcurve die het resultaat is van de nucleïnezuuramplificatie. De software analyseert de
resultaten automatisch en worden aangegeven met een kleurencode, afhankelijk van het resultaat. Een positief of negatief
resultaat wordt bepaald door de analyse van een aantal unieke curveparameters. Vermoedelijke positieve resultaten
worden onmiddellijk gerapporteerd, terwijl de negatieve en inspectieresultaten pas na de voltooiing van de analyse worden
weergegeven.
Vermoedelijke positieve monsters moeten worden bevestigd overeenkomstig de standaardwerkvoorschriften van het
laboratorium of volgens de bevestiging van de relevante referentiemethode
primaire verrijkte tot de secundaire verrijkte bouillon (indien van toepassing), gevolgd door latere plating en bevestiging van
adequate methoden voor biochemische en serologische isolaten.
Binnen de context van de NF-VALIDATIE, moeten alle monsters die als positief worden geïdentificeerd door het 3M
Moleculair detectie assay 2 - Listeria monocytogenes bevestigd worden door één van de volgende tests:
Optie 1: Gebruik van de ISO 11290
Optie 2: Implementeren van een bevestigingsmethode bestaande uit: Toevoegen van 0,1 ml van het Demi Fraser bouillon.
Strijk deze direct op Ottaviani Agosti agar als beschreven in ISO 11290
Optie 3: Gebruik van nucleïnezuur zoals beschreven in de EN ISO 7218
van geselecteerde agar (zie optie 1 of 2).
Optie 4: Gebruik van een andere methode voor gecertificeerde NF-VALIDATIE, waarvan het principe anders moet zijn
dan het 3M Moleculaire detectie assay 2 - Listeria monocytogenes. Het gehele protocol dat wordt beschreven voor deze
tweede validatiemethode dient te worden gebruikt. Alle stappen voorafgaand aan de start van de bevestiging moeten bij
beide methoden gelijk zijn.
In het geval van disharmonische resultaten (vermoedelijke positief met de alternatieve methode, niet-bevestigd door één
van de hierboven beschreven middelen) moet het laboratorium de nodige stappen ondernemen om de geldigheid van het
verkregen resultaat te waarborgen.
OPMERKING: Zelfs een ongeldig monster zal u geen nulresultaat geven, want de 3M Moleculaire Analyse 2 - Listeria
monocytogenes amplificatiereagentia hebben een "achtergrond" van relatieve lichteenheid (RLU).
In het onwaarschijnlijke geval van ongebruikelijke lichtuitvoer, definieert het algoritme dit als "Inspecteren". 3M beveelt de
gebruiker aan om de test voor de te inspecteren monsters opnieuw uit te voeren. Als het resultaat nog steeds "Inspecteren"
is, voert u een bevestigingstest uit aan de hand van uw voorkeursmethode of zoals opgedragen door de plaatselijke
regelgeving
Bijlage A. Protocolonderbreking: Opslag en hertesten van warmtebehandelde lysaten
1. Om een warmtebehandeld lysaat te bewaren, plaatst u opnieuw een schone dop op het lysebuisje (zie "Lyse", 4.5)
2. Bewaar maximaal 72 uur bij 4 tot 8 °C.
3. Bereid een bewaard monster voor op de amplificatie door het 2-3 keer om te draaien om het te mengen.
4. Haal de doppen van de buisjes.
5. Plaats de gemengde lysaatbuisjes op het 3M Moleculaire Detectie - Verwarmingsblokinzetstuk en verwarm gedurende
5 ±1 minuten op 100 ±1 °C.
6. Haal het onbedekte rek met LO-buisjes uit het verwarmingsblok en laat het minstens 5 minuten en hoogstens 10
minuten afkoelen in het 3M Moleculaire Detectie - Koelblokinzetstuk.
7. Ga verder met het protocol vanaf de rubriek 'Amplificatie', die hierboven wordt omschreven.
Als u vragen hebt over specifieke toepassingen of procedures, kunt u onze website www.3M.com/foodsafety bezoeken of
contact opnemen met uw plaatselijke vertegenwoordiger of distributeur van 3M.
-standaard beginnen bij verrijking van Demi-Fraser bouillon
(3)
10
NL
(Nederlands)
, te beginnen met de overdracht van de
(1, 2, 3)
.
(3)
-standaard, uitgevoerd op geïsoleerde koloniën,
(5)