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BD Totalys™ SlidePrep Benutzerhandbuch
5.5.3 Probenverarbeitung
Vorbereiten-und-Färben Läufe
Bei einem Vorbereiten-und-Färben-Lauf mit BD SurePath™ werden die folgenden Schritte vom
SlidePrep ausgeführt:
•
Es werden 450 µl Tris-gepuffertes Wasser zu jeder Absetzkammer hinzugefügt, und es
wird Tris-gepuffertes Wasser zu jedem C-Röhrchen hinzugefügt.
•
Mit einer Transferspitze wird das Zellpellet 8 Mal gemischt, dann werden 200 µl in die
Absetzkammer transferiert, wo die Substanz mindestens 10 Minuten ruhen kann.
Während dieser Zeit binden sich die Zellen an die BD SurePath™ PreCoat Slides
(Beschichtete Objektträger) und bilden eine dünne Zellschicht.
•
Zum Entfernen ungebundener Zellen werden Spülschritte mit Inkubationen durchgeführt:
600 µl Alcohol Blend Rinse (Spüllösung auf Alkoholbasis) mit Inkubation und 600 µl
Tris-gepuffertes Wasser mit Inkubation.
•
300 µl Hämatoxylin und 300 µl EA/OG werden den Objektträgern für die Papanicolaou-
Färbung hinzugefügt (zwischen den Inkubations- und Spülschritten mit Tris-gepuffertem
Wasser und Alcohol Blend Rinse (Spüllösung auf Alkoholbasis)).
Nur Vorbereiten Läufe
Bei einem Nur-Vorbereiten-Lauf mit BD SurePath™ werden die folgenden Schritte vom SlidePrep
ausgeführt:
•
Es werden 450 µl Tris-gepuffertes Wasser zu jeder Absetzkammer hinzugefügt, und es
wird Tris-gepuffertes Wasser zu jedem C-Röhrchen hinzugefügt.
•
Mit einer Transferspitze wird das Zellpellet 8 Mal gemischt, dann werden 200 µl in die
Absetzkammer transferiert, wo die Substanz mindestens 10 Minuten ruhen kann.
Während dieser Zeit binden sich die Zellen an die BD SurePath™ PreCoat Slides
(Beschichtete Objektträger) und bilden eine dünne Zellschicht.
•
Zum Entfernen ungebundener Zellen werden Spülschritte mit Inkubationen durchgeführt:
600 µl Alcohol Blend Rinse (Spüllösung auf Alkoholbasis) mit Inkubation, eine Spülung mit
300 µl Tris-gepuffertem Wasser mit Inkubation, drei Spülungen mit 300 µl Tris-gepuffertem
Wasser und eine Spülung mit 300 µl Alcohol Blend Rinse (Spüllösung auf Alkoholbasis).
Nur-Färben Läufe
Bei einem Nur-Färben-Lauf mit BD SurePath™ werden die folgenden Schritte vom SlidePrep
ausgeführt:
•
600 µl Alcohol Blend Rinse (Spüllösung auf Alkoholbasis) und zwei Spülungen mit 600 µl
Tris-gepuffertem Wasser (zwischen den Inkubationen) zur Vorbereitung der Proben auf
die Färbung.
•
300 µl Hämatoxylin und 300 µl EA/OG werden den Objektträgern für die Papanicolaou-
Färbung hinzugefügt (zwischen den Inkubations- und Spülschritten mit Tris-gepuffertem
Wasser und Alcohol Blend Rinse (Spüllösung auf Alkoholbasis)).
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