Probenentnahme - Sartorius Stedim Biotech BIOSTAT RM 20 basic Bedienungsanleitung

4.6.2 Inokulation

4.6.3 Probenentnahme

94 Menübedienung
4. Desinfizieren Sie das Luer-Septum: Wischen bzw. besprühen Sie dazu den oberen
Teil des Luer-Septums mit 70 %-igem Alkohol (oder einem gleichwertigen Mittel).
5. Anschluss der Spritze: Verbinden Sie unter aseptischen Bedingungen eine sterile
Einmalspritze ohne Kanüle mit dem Luer-Anschluss.
6. Öffnen Sie die Schlauchklemme des Luer-Septums.
1. Befüllen Sie den CultiBag RM über das Luer-Septum mit dem Spritzeninhalt.
Entfernen Sie danach die Spritze vom Luer-Septum.
2. Desinfizieren Sie das Luer-Septum erneut und verschließen Sie es dann wieder
mit der Schutzkappe.
3. Lassen Sie im Schlauch verbliebene Flüssigkeit zurücklaufen. Drücken Sie dazu
den Schlauch ein paar Mal zusammen, um sicherzustellen, dass die eventuell
im Schlauch verbliebene Flüssigkeit in den Bioreaktor zurückläuft. Schließen Sie
dann die Schlauchklemme.
4. Starten Sie nun die Wippbewegung erneut. Stellen Sie die Geschwindigkeit
so ein, dass auf der Oberfläche der Flüssigkeit eine Wellenbewegung sichtbar wird.
Bei übermäßiger Schaumbildung muss die Geschwindigkeit verringert werden.
Bei der Probenentnahme wird genauso vorgegangen wie bei der Inokulation;
auch hier wird eine Spritze ohne Kanüle benutzt. Es ist unbedingt darauf
zu achten, dass vor der Entnahme der repräsentativen Probe, die Zellen, welche
sich innerhalb des Schlauchs befinden, herausgezogen werden. Nehmen Sie
daher zwei Proben wie in diesem Abschnitt beschrieben, die erste verwerfen Sie,
die zweite enthält die repräsentative Probe.
Das Luer-Septum ist auf 50 sterile Probenentnahmen bzw. Inokulationen
ausgelegt. Es enthält ein Silikon-Septum, das den Schlauch automatisch
abdichtet, wenn die Verbindung getrennt wird. Auch die Probe ist vollständig
geschützt, da von außen keine Aerosole zugeführt werden. Bei niedrigen
Wippgeschwindigkeiten (< 15 Wippbewegungen/min) können sich die Zellen
absetzen, sodass die Probenentnahme unter Umständen nicht repräsentativ ist.
Deshalb sollte man die Wippgeschwindigkeit ca. 5-10 Minuten vor der
Probenentnahme auf 15 Wippbewegungen/min. erhöhen. Danach kann sie
wieder verringert werden.