R-Biopharm RIDAGENE CMV PG9005 Bedienungsanleitung Seite 76

Contrôle négatif :
Échantillon :
Contrôle positif :
Étalon (A, B, C, D) :
Fermer hermétiquement les flacons ou les plaques de réaction, les centrifuger
brièvement à faible vitesse et les transférer vers un dispositif de PCR en temps réel.
Lancer la PCR selon les réglages du dispositif (voir tableau 3).
9.3 Réglages du dispositif
Tableau 3 : Profil de PCR en temps réel pour les appareils LightCycler
Mx3005P, Rotor-Gene Q et CFX96
Décontamination
Dénaturation initiale
Cycles
PCR Dénaturation
Hybridation
Extension
Remarque : pour les étalons A, B, C et D, entrer le nombre total de copies
pour chaque réaction dans le fichier de configuration du logiciel
du dispositif de PCR en temps réel. Utiliser 20 µl d'étalon, pour
obtenir les concentrations suivantes :
Étalon A : 1 x 10² gEq/réaction
Étalon B : 1 x 10
Étalon C : 1 x 10
Étalon D : 1 x 10
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Ajouter 20 µl d'eau de PCR au mélange maître pré-pipeté
à titre de contrôle négatif.
Ajouter 20 µl d'extrait d'ADN au mélange maître pré-pipeté
de réactions de l'échantillon.
Ajouter 20 µl de Positive Control au mélange maître
pré-pipeté dans le flacon de réaction.
Ajouter 20 µl de Standard (A, B, C, D) aux flacons de
réaction indiqués pour chaque mélange maître pré-pipeté.
3
gEq/réaction
4
gEq/réaction
5
gEq/reaction
2019-05-28
2 min, 50 °C
2 min, 94 °C
45 cycles
10 s, 94 °C
30 s, 60 °C, « détection »
20 s, 72 °C
®
480II,

RIDA GENE CMV