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R-Biopharm RIDAGENE CMV PG9005 Bedienungsanleitung Seite 70

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immunodépresseur. Les organes les plus souvent touchés sont les poumons, le foie,
les intestins et les yeux. Une infection des poumons peut entraîner une pneumonie.
Au niveau des yeux, il existe un risque de cécité en cas d'infection de la rétine
(rétinite).
3. Principe du test
®
RIDA
GENE CMV est un test de PCR en temps réel pour la détection qualitative et
quantitative directe de cytomégalovirus dans des échantillons humains de plasma
(EDTA) (détection quantitative) et d'urine (détection qualitative). Après isolement de
l'ADN, le fragment de gène spécifique au CMV (MIEA, si présent) est amplifié.
Les séquences cibles amplifiées sont détectées à l'aide de sondes de ligand du petit
sillon (MGB) fixées à une extrémité à l'extincteur et à l'autre extrémité à un colorant
fluorescent indicateur (fluorophore). Les sondes sont activées lorsqu'elles s'hybrident
avec la séquence cible. Cette liaison est de plus stabilisée par la liaison du MGB au
niveau du petit sillon de l'ADNdb. À ce stade, l'indicateur émet un signal fluorescent
qui est détecté par l'unité optique d'un dispositif de PCR en temps réel. Le signal
fluorescent augmente avec la quantité d'amplicons formés. À des fins de
quantification, le signal est comparé aux courbes standard A, B, C et D réalisées en
parallèle, le résultat étant exprimé en équivalents génomiques/réaction
(gEq/réaction). Un facteur (gEq/ml) tenant compte des dilutions de l'extraction d'ADN
(en fonction du dispositif utilisé) et l'approche PCR sont utilisés pour déterminer la
teneur en ADN de l'échantillon en équivalents génomiques/ml (gEq/ml). La
conversion en unités internationales/ml (UI/ml) est effectuée à l'aide d'un facteur de
correction (UI/ml) qui tient également compte de la traçabilité selon le premier
3
standard international de l'OMS pour le cytomégalovirus humain
.
®
Le test RIDA
GENE CMV contient un Internal Control DNA (ICD) pour contrôler la
préparation de l'échantillon et l'éventuelle inhibition de la PCR.
2019-05-28
70
RIDA
GENE CMV

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