R-Biopharm RIDAGENE CMV PG9005 Bedienungsanleitung Seite 74

d'échantillons différents. Les pipettes utilisées pour la préparation des échantillons
doivent uniquement servir à cette fin. N'utiliser que des pipettes à déplacement
positif ou des pipettes avec pointes à filtre. Les pointes de pipette doivent être
stériles et exemptes d'ADNase et d'ARNase ainsi que d'ADN et d'ARN.
Les réactifs nécessaires doivent être traités sous une hotte à flux laminaire. Les
réactifs nécessaires à l'amplification doivent être préparés de façon adaptée à une
procédure de test. Les pipettes utilisées pour les réactifs doivent uniquement servir à
cette fin. N'utiliser que des pipettes à déplacement positif ou des pipettes avec
pointes à filtre. Les pointes de pipette doivent être stériles et exemptes d'ADNase et
d'ARNase ainsi que d'ADN et d'ARN.
Pour éviter toute contamination, manipuler les produits de l'amplification de manière
à éviter du mieux possible leur propagation dans l'environnement. Les pipettes
utilisées pour les produits de l'amplification doivent uniquement servir à cette fin.
8. Prélèvement et conservation des échantillons
8.1 Isolement de l'ADN à partir de plasma (EDTA)
Pour isoler l'ADN à partir du plasma (EDTA), les échantillons utilisés doivent être
conservés selon les directives du laboratoire, mais transportés et/ou entreposés
pendant tout au plus 3 jours entre +2 et +8 °C, ou entreposés à -20 °C jusqu'à
30 jours. Les échantillons conservés pendant plus de 30 jours doivent être placés à -
70 °C. Il est recommandé de préparer des aliquotes des échantillons pour éviter des
cycles répétés de décongélation/congélation. Les échantillons congelés doivent être
décongelés immédiatement avant extraction pour éviter toute dégradation de l'acide
nucléique.
®
Le test RIDA GENE CMV contient un Internal Control DNA (ICD) qui peut être
utilisé comme contrôle de l'extraction pour la préparation des échantillons et comme
contrôle simultané de l'inhibition. L'extraction requiert l'utilisation de 10 µl
de Internal Control DNA .
Pour la purification à l'aide de l'appareil MagNA Pure 96 (Roche), utiliser 200 µl de
plasma et pipeter 10 µl de Internal Control DNA dans la cartouche de traitement
de l'appareil MagNA Pure 96. Effectuer la préparation suivant le protocole
« Pathogen Universal 200 ». Éluer dans 50 µl.
8.2 Isolement de l'ADN à partir d'urine
Pour isoler l'ADN à partir d'urine, les échantillons utilisés doivent être recueillis dans
des récipients exempts de conservateurs selon les directives du laboratoire, et non
conservés et/ou transportés pendant plus de 4 heures à température ambiante
(+18 à +25 °C). Les échantillons peuvent aussi être conservés jusqu'à 3 jours entre
+2 et +8 °C. Les aliquotes des échantillons peuvent être conservés jusqu'à 30 jours à
-20 °C. Les échantillons conservés pendant plus de 30 jours doivent être placés à
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2019-05-28
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