Inhaltsverzeichnis
Werbung
Verfügbare Sprachen
Verfügbare Sprachen
varje lotnummer. Lotnumret och antikroppnivåns me-
delvärde och spridningsområde (± en dubbel spädning
på vardera sidan om medelvärdet) står angivna på
flaskans etikett och skall användas som vägledning för
testsystemets prestanda.
Det är viktigt att man inte blandar ihop färgningens
intensitet med eventuell förekomst eller frånvaro av
antinukleära antikroppar. Den viktigaste faktorn vid
bedömningen av om en viss serumspädning är positiv
eller inte är om det finns ett klart urskiljningsbart mönster,
oavsett färgningens intensitet.
Denna titrerbara kontroll uppvisar det typiska fläckiga
mönster som är associerat med RNP-antikroppen. Det
kan även finnas ett andra mönster eller NSp I (flera
åtskilda fläckar i interfascellkärnan), men detta är det
typiska fläckmönster som skall användas för att avläsa
ändpunkter.
De värden som erhållits i vårt laboratorium kan skilja sig
från era. Några av de faktorer som kan påverka era
resultat kan vara, men är inte begränsat till:
1. Korrekt placering av mikroskopljusets bana. Se bruk-
sanvisningen till mikroskopet för mer information.
2. Objektivets numeriska bländaröppning. Den
numeriska bländaröppningen är förknippad med
ljusinsamlingsförmågan och objektivets upplösning.
Detta värde står angivet på sidan av objektivet.
3. Precision och exakthet i spädningsteknik, utrustning
och testmetodernas genomförande.
TOLKNING AV TESTRESULTAT
200 gångers total förstoring rekommenderas för
screening av positiv/negativ, medan 400 gångers total
förstoring rekommenderas för mönsterigenkänning och
påvisning av mitotiska celler.
Negativt: Ett serum betraktas som negativt för antinuk-
leära antikroppar om nukleärfärgningen är mindre än
eller lika med den negativa kontrollbrunnen utan klart
urskiljningsbart mönster. Cytoplasman kan uppvisa svag
färgning, med ljusare färgning i de mitotiska cellernas
icke-kromosomområde, men utan ett klart urskiljnings-
bart nukleärt mönster.
Positivt: Ett serum betraktas som positivt om kärnan
uppvisar ett klart urskiljningsbart mönster av färgning i
flertalet interfasceller.
Antikroppnivåer: Vid avläsning av antikroppnivåer
börjar många laboratorier med att avläsa den brunn
som innehåller det mest spädda provet och läser
"baklänges" till spädningen 1:40. Den första brunnen
med ett klart urskiljningsbart mönster är antikroppnivåns
ändpunkt. Vi rekommenderar denna teknik för att
fastställa antikroppnivåns ändpunkter. Det är viktigt att
inte blanda ihop färgningens intensitet med närvaro
respektive frånvaro av antinukleära antikroppar.
Den viktigaste faktorn vid bedömning av om en viss
serumspädning är positiv eller ej är om det finns ett klart
urskiljningsbart nukleärt mönster, oavsett färgningens
intensitet.
Varning: En del sera kan uppvisa nukleär och cytoplas-
misk färgning utan ett synbart nukleärt mönster. Detta
fenomen beror i allmänhet på heterofila antikroppar
och bör rapporteras som negativt (31).
ENZYMFÄRGNING
Färgningsgraden har inget bevisat kliniskt värde och en-
dast begränsat värde som indikator på antikroppnivån
(29). För att förenkla tolkningen skall screeningresultaten
registreras som starkt positiva eller positiva och titreras
därefter.
Starkt positiv reaktion: Mörk till mycket mörkblå färgn-
ing, klar cellkontur, skarpt definierat nukleärt mönster.
Positiv reaktion: Svag eller dämpad blå/mörklila färgn-
ing med större färgningsvariabilitet mellan cellerna.
Cellkonturen kan vara mindre väldefinierad i vissa celler,
medan majoriteten av celler fortfarandeuppvisar ett
klart urskiljningsbart färgningsmönster.
OBSERVERA: Eftersom cellerna odlas direkt på objekt-
glasets yta befinner sig inte alla celler i samma skede i
cellcykeln. Det är inte ovanligt att man ser olika grader
av färgningsintensitet från cell till cell på grund av
skillnaderna i koncentration och de olika antigenernas
placering under cellcykeln.
RAPPORTERING AV RESULTAT
Screening: Resultaten skall rapporteras som starkt posi-
tiva eller positiva vid spädning 1:40 och det nukleära
färgningsmönstret skall rapporteras.
Bestämning av antikroppnivå: Resultatet skall rap-
porteras som den sista seriespädningen med klart ur-
skiljningsbar färgning. Resultat med en stark reaktion vid
spädning 1:2560 skall rapporteras som större än 1:2560.
Antikroppnivåer på 1:40 till 1:80 betraktas som låga. 1:
160 till 1:320 betraktas som medelhöga antikroppnivåer
och 1:640 och mer betraktas som höga.
MÖNSTERDETEKTION
Homogen: En fast färgning av kärnan med eller utan
synbar maskering av nukleolerna. De metafasmitotiska
cellernas kromosomområde är klart positivt med en
jämn eller perifer färgningsintensitet som är större än,
eller lika med, interfaskärnornas.
Synonymer: Diffus, fast.
Nukleära antigener: dsDNA, nDNA, DNP, histon.
Sjukdomssamband: Höga antikroppnivåer tyder på
SLE. Låga antikroppnivåer tyder på SLE eller an-
nan bindvävssjukdom (32).
Perifer: En fast färgning, främst runt kärnans yttre ring,
med svagare färgning mot kärnans mitt. De metafasmi-
totiska cellernas kromosomområde är klart positivt med
en jämn eller perifer färgningsintensitet större än, eller
lika med, interfaskärnornas.
Synonymer: Kantig, raggig, hinnaktig.
Nukleära antigener: dsDNA, ssDNA, nDNA, DNP,
histon.
Sjukdomssamband: Höga antikroppnivåer tyder på
SLE.
Låga antikroppnivåer tyder på SLE, eller annan bind-
vävssjukdom (32).
Fläckig. En grov- eller finkornig färgning av kärnan i
allmänhet utan färgning av nukleolerna. De metafas-
mitotiska cellernas icke-kromosomområde uppvisar
färgning, medan kromosomområdet inte är färgat.
Nukleära antigener: Sm; RNP; Scl-70; SS-A; SS-B och
andra antigen-/antikroppsystem som ännu inte är
karaktäriserade.
Sjukdomssamband: Höga antikroppnivåer tyder på
SLE (Sm-antigen), blandad bindvävssjukdom
(RNP-antigen), sklerodermia (Scl-70-antigen) eller
Sjögrens syndrom - Sicca-syndromet (SS-A- eller
SS-B-antigen). Lägre antikroppnivåer kan tyda på
annan bindvävssjukdom (33).
Nukleolär: Stor, grovfläckig färgning inuti kärnan, i
allmänhet mindre än sex stycken per cell, med eller
utan enstaka fina fläckar, 5-10 stycken till antalet. De
metafasmitotiska cellernas icke-kromosomområde
uppvisar stark färgning, medan kromosomområdet kan
ha en svag färgning. Anafasa och telofasa celler kan
uppvisa liknande färgning som interfaskärnorna.
Nukleära antigener: Benämns i allmänhet 4-6s RNA
och andra nukleära antigener, t ex fibrillarin, RNA
polymeras I, NOR 90 och PM/Scl.
Sjukdomssamband: Höga antikroppnivåer vid sklero-
dermia och Sjögrens syndrom (34).
Centromer: Ett avskiljt fläckigt färgningsmönster som
i hög grad tyder på CREST*-syndromvarianten av
framskriden systemisk skleros (25). De nukleära fläckarna
är mycket avskiljda och vanligtvis en multipel av 46
(oftast 23-46 fläckar per kärna). Eftersom centromerer
är sammandragningar där spindelfibrer binds till kromo-
somer uppvisar de mitotiska cellerna samma fläckreak-
tion i kromosomområdet (12).
Synonymer: ACA, åtskiljt fläckig.
Nukleära antigener: Kromosom centromer (kineto-
chore).
Sjukdomssamband: Tyder i hög grad på CREST*-syn-
dromvarianten av progressiv systemisk skleros (25).
*CREST är en form av PSS med framskriden kalcinos,
Raynaud-fenomen, esofageal dysfunktion, sklerodaktyli
och telangiektasi.
MITOTISKA CELLER
DETEKTION
Mitotiska celler bör kunna synas i varje fält, när man
granskar dem i minst 200 gångers förstoring. Studera
cellen i 400 gångers förstoring för att verifiera att en
cell befinner sig i mitos. Mitotiska celler har en karak-
täristisk rund form utan påvisbart nukleärt membran.
Kromosomområdet i mitotiska celler har i allmänhet
en oregelbunden form inuti cellen på grund av att
nukleärmembran saknas och kromosomerna är extremt
sammandragna.
35
Werbung
Inhaltsverzeichnis
