immuno concepts Colorzyme ANA Für Professionellen Gebrauch Seite 18

(Métaphase)
CELLULA MITOTICA
(Metafase)
Associazione con patologie: titoli alti suggeriscono
SLE (antigene Sm), malattia mista del tessuto con-
nettivo (antigene RNP), sclerodermia (antigene
Scl-70) o complesso sindrome di Sjögren-sicca
(antigene SS-A o SS-B). Titoli bassi possono sug-
gerire SLE o altre patologie del tessuto connet-
tivo.(33)
Nucleolare: grande colorazione a chiazze grossolana
all'interno del nucleo, in genere meno di 6 per cellula,
con o senza chiazze sottili occasionali in numero di 5-10.
La regione non cromosomica delle cellule mitotiche
CÉLULA MITÓTICA
metafase mostra una forte colorazione, mentre la
regione cromosomica può mostrare una colorazione
(Metafase)
tenue. Cellule anafase e telofase possono mostrare una
colorazione simile ai nuclei interfase.
Antigeni nucleari: in genere chiamati 4-6s RNA e altri
antigeni nucleari come fibrillarina, RNA polimerasi
I, NOR 90 e PM/Scl.
Associazione con patologie: titoli alti prevalenti nella
sclerodermia e nella sindrome di Sjögren.(34)
Centromero: un pattern a chiazze discreto fortemente
indicativo della sindrome CREST* variante della sclerosi
sistemica progressiva.(25) Le chiazze nucleari sono
molto discrete e in genere in qualche modo multiple
di 46 (in genere 23-46 chiazze per nucleo). Poiché i
centromeri sono restringimenti in cui le fibre del fuso si
MITOTISCHE ZELLE
fissano ai cromosomi, le cellule mitotiche mostreranno
la stessa reazione a chiazze nella regione cromoso-
(Metaphase)
mica.(12)
Sinonimi: ACA; a chiazze discrete.
Antigeni nucleari: centromero cromosomico (cineto-
coro).
Associazione con patologie: fortemente indicativo
della sindrome CREST*, variante della sclerosi
sistemica progressiva.(25)
*CREST è una forma di PSS con calcinosi prominente,
fenomeno di Raynaud, disfunzione esofagea, sclero-
dattilia e teleangectasia.
CELLULE MITOTICHE
MITOTISK CELL
RILEVAMENTO
Le cellule mitotiche dovrebbero essere visibili su ogni
(Metafas)
campo se visualizzate con ingrandimento 200X o
inferiore. Per verificare se una cellula è in mitosi, visualiz-
zare con ingrandimento 400X. Le cellule mitotiche
mostrano una caratteristica forma cellulare rotonda
senza alcuna membrana nucleare rilevabile. La regione
cromosomica delle cellule mitotiche in genere mostra
una forma irregolare all'interno della cellula dovuta
alla mancanza di membrana nucleare ed un estremo
restringimento dei cromosomi.
Sieri positivi per DNA e/o DNP e/o istone (come il
controllo positivo omogeneo della Immuno Concepts)
mostreranno una colorazione brillante della regione
cromosomica di queste cellule. In campioni negativi
per DNA e/o DNP e/o istone (come il controllo positivo
a chiazze IC) le cellule mitotiche non mostreranno una
colorazione cromosomica e saranno difficili da vedere.
USO DELLE CELLULE MITOTICHE
Distinzione tra anticorpi a chiazze ed omogenei: il pat-
tern di colorazione a chiazze sottili è talvolta difficile da
differenziare da una colorazione omogenea. Se il pat-
tern è omogeneo, avverrà una colorazione uniforme
dei cromosomi delle cellule mitotiche. Se il pattern
è proprio a chiazze, la regione fuori dai cromosomi
mostrerà una sottile reazione a chiazze.
NOTA: se si presenta una chiazzatura sottile dell'intera
cellula mitotica con colorazione uniforme della regione
cromosomica, è molto probabile che siano presenti
due o più anticorpi. Riportare la diluizione dello screen-
ing come a chiazze/omogenea e titolare ciascun
anticorpo al punto di equivalenza.
La Zona Cromosomica
Citoplasma /
Nucleoplasma
Región Cromosómica
Citoplasma /
Nucleoplasma
Chromosomenbereich
Zytoplasma /
Nukleoplasma
ZELLE AUSSERHALB DER MITOSEPHASE
Kromosomområde
Cytoplasma /
Nukleoplasma
18
(Interphase)
CELLULA NON IN MITOSI
(Interfase)
Anticorpo della membrana periferica contro anticorpo
della membrana nucleare: un anticorpo che mostra un
pattern periferico che in genere si associa con antigeni
nucleari DNA/DNP. Titoli alti di questi anticorpi suggeris-
cono SLE. In substrati che non comprendono cellule
mitotiche, il pattern periferico può essere difficile da
distinguere dall'anticorpo della membrana nucleare.
Usando le cellule mitotiche della Immuno Concepts,
questi pattern possono essere differenziati, perché la
regione cromosomica delle cellule mitotiche verrà
colorata intensamente in un pattern periferico senza
però essere colorata dall'anticorpo della membrana
CÉLULA NO MITÓTICA
nucleare. Questa distinzione è clinicamente importante
perché l'anticorpo della membrana nucleare non ha
(Interfase)
specificità DNA/DNP e non è associata all'SLE.(35)
Anticorpo Anti-Centromero (ACA) contro anticorpo
atipico a chiazze somigliante al centromero: per verifi-
care l'anticorpo anti-centromero la regione cromoso-
mica delle cellule mitotiche dovrebbe avere un colore
brillante con chiazze discrete. Se la regione cromoso-
mica non si colora, l'anticorpo non ha né specificità
cinetocoro né associazione con la variante CREST della
sclerodermia.(36) Se la regione cromosomica non si
colora, l'anticorpo non è anti-centromero e va riportato
come "a chiazze atipico".
COLORAZIONE CITOPLASMATICA
Sebbene gli anticorpi degli antigeni citoplasmatici non
(Interphase)
siano comunemente associati a patologie del tessuto
connettivo, questi anticorpi possono essere rilevati
usando substrati di coltura di cellule epiteliali.(37) Gli an-
ticorpi mitocondriali e del muscolo liscio sono i due anti-
corpi rilevati più di frequente e sono in genere associati
a mononucleosi, epatite cronica attiva e patologie al
fegato.(38- 39) Usando il substrato cellulare HEp-2, è
stato anche dimostrato l'anticorpo del muscolo liscio in
pazienti con verruche.(40)
Anticorpo anti-micondriale (AMA): chiazze discrete
concentrate nella regione perinucleare della cellula ed
estese in bassa densità nelle regioni esterne del cito-
plasma. Vanno distinte dall'anticorpo anti-Golgi, che in
ICKE-MITOTISK CELL
genere colora solo un lato della regione perinucleare e
dall'anticorpo anti-ribosomico che mostra chiazze più
(Interfas)
sottili con un aspetto filiforme in linea con la posizione
del reticolo endoplasmatico all'interno della cellula.
NOTA: le chiazze perinucleari possono essere molto
facilmente distinguibili dalla colorazione nucleare
periferica notando che le chiazze mitocondriali
formano una colorazione a chiazze ininterrotta intorno
alla parte esterna della membrana nucleare mentre i
sieri periferici formano una colorazione uniforme e liscia
all'interno della membrana nucleare.
RIPORTARE I SIERI COME NEGATIVI PER GLI ANTICORPI
ANTINUCLEARI E VERIFICARE I POSITIVI PER L'ANTICORPO
ANTIMITOCONDRIALE SU SPECIFICO SUBSTRATO AMA.
Anticorpo anti-muscolo liscio (ASMA): colorazione fibro-
sa molto sottile sull'intero citoplasma delle cellule con
aspetto a "tela di ragno". A differenza dell'anticorpo
mitocondriale, la colorazione dell'anticorpo del mus-
colo liscio è uniforme in tutto il citoplasma e può anche
estendersi al di sopra del nucleo. Le cellule mitotiche
in genere mostrano grandi chiazze discrete al di fuori
della regione cromosomica. È stato dimostrato che
l'anticorpo del muscolo liscio ha un'alta specificità
all'actina.(41-42)
RIPORTARE I SIERI COME NEGATIVI PER GLI ANTICORPI
ANTINUCLEARI E VERIFICARE I POSITIVI PER L'ANTICORPO
ANTI-MUSCOLO LISCIO SU SPECIFICO SUBSTRATO ASMA.
LIMITI DEL TEST
1. Le diagnosi non possono essere fatte solo sulla base
del rilevamento dell'anticorpo antinucleare. Il med-
Citoplasma
Membrana Nucleare
Nucleoplasma
Nucleoli
Citoplasma
Membrana Nuclear
Núcleo
Nucleólos
Zytoplasma
Zellkermembran
Nukleoplasma
Nucleoi
Cytoplasma
Nukleärt Membran
Nukleoplasma
Nukleol