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d'autres collagénoses (32).
Mouchetée: Fluorescence granulaire fine ou grossière
du noyau généralement sans coloration des nucléoles.
La région non chromosomique des cellules mitotiques
en métaphase présente une fluorescence, contraire-
ment à la région chromosomique (négative).
Antigènes nucléaires: Sm, RNP, Scl-70, SS-A, SS-B et
d'autres systèmes antigène-anticorps non encore
caractérisés.
Associations cliniques: Les titres élevés suggèrent un
LED (antigène Sm), une connectivité mixte (anti-
gène RNP), une sclérodermie (antigène Scl-70) ou
un syndrome de Goujerot-Sjögren (antigène SS-A
ou SS-B). Les titres plus faibles peuvent suggérer
d'autres collagénoses (33).
Nucléolaire: Large fluorescence mouchetée grossière
dans le noyau, en général moins de 6 par cellule, avec
ou sans fines mouchetures occasionnelles (entre 5 et
10). La région non chromosomique des cellules mito-
tiques en métaphase présente une forte fluorescence,
contrairement à la région chromosomique (faible
fluorescence). Les cellules en anaphase et télophase
peuvent présenter une fluorescence similaire à celles
des noyaux interphasiques.
Antigènes nucléaires: Généralement appelés ARN
4-6S et autres antigènes nucléaires tels que fibril-
larine, ARN polymérase I, NOR 90 et PM/Scl.
Associations cliniques: Titres élevés prévalant dans la
sclérodermie et le syndrome de Sjögren (34).
Centromérique: Image fluorescente mouchetée
discrète suggérant fortement un syndrome CREST*,
variante de la sclérodermie (25). Les mouchetures
nucléaires sont très discrètes et généralement par
multiples de 46 (généralement 23-46 mouchetures par
noyau). Les centromères étant des constrictions où
les fibres fusiformes s'attachent aux chromosomes, les
cellules mitotiques présenteront la même réaction de
moucheture dans la région chromosomique (12).
Synonymes: ACA, mouchetée discrète.
Antigènes nucléaires: Centromères chromosomiques
(kinétochores).
Associations cliniques: Suggère fortement un syn-
drome CREST*, variante de la sclérodermie (25).
* CREST est une forme de sclérodermie avec calcinose
marquée, syndrome de Raynaud, trouble fonctionnel
de l'œsophage, sclérodactylie et télangiectasie.
CELLULES MITOTIQUES
DÉTECTION
Les cellules mitotiques doivent être visibles sur chaque
champ aux grossissements inférieurs ou égaux à 200X.
Pour vérifier si une cellule est en mitose, utiliser un gros-
sissement à 400X. Les cellules mitotiques présentent
une forme cellulaire arrondie caractéristique sans
membrane nucléaire détectable. La région chromo-
somique des cellules mitotiques présente généralement
une forme irrégulière, due à l'absence de membrane
nucléaire, ainsi qu'une constriction extrême des chro-
mosomes.
Les sérums positifs aux anticorps anti-ADN et/ou DNP
et/ou anti-histones (cas du contrôle positif homogène
d'Immuno Concepts) présenteront une fluorescence
intense de la région chromosomique de ces cellules.
Dans les échantillons négatifs aux anticorps anti-ADN
et/ou DNP et/ou anti-histones (cas du contrôle positif
moucheté d'IC), les cellules mitotiques ne présenteront
pas de fluorescence chromosomique et peuvent
s'avérer difficiles à voir.
UTILISATION DES CELLULES MITOTIQUES
MITOTIC CELL (Metaphase)
Distinction anticorps mouchetés/anticorps homogènes:
Une image fluorescente finement mouchetée est
parfois difficile à différencier d'une fluorescence
homogène. Si le motif est homogène, la fluorescence
CELLULE MITOTIQUE
(Métaphase)
Chromosome Region
Cytoplasm/
Nucleoplasm
Région chromosomique
Cytoplasme /
Nucléoplasme
des chromosomes des cellules mitotiques sera uniforme.
Si l'image est parfaitement mouchetée, l'extérieur
des chromosomes présentera une réaction finement
mouchetée.
REMARQUE: Si la fine moucheture de la totalité de
la cellule mitotique survient en même temps qu'une
fluorescence uniforme de la région chromosomique,
il est fort probable qu'au moins deux anticorps soi-
ent présents. Noter la dilution de test comme étant
mouchetée/homogène et titrer chaque anticorps pour
obtenir un résultat.
Anticorps périphérique vs anticorps anti-membrane
nucléaire: Les anticorps qui présentent un motif péri-
phérique sont généralement associés à la présence
d'antigènes nucléaires anti-ADN/DNP. Les titres élevés
de ces anticorps suggèrent un LED. Dans les substrats
qui ne contiennent pas de cellules mitotiques, il peut
s'avérer difficile de distinguer le motif périphérique
de l'anticorps anti-membrane nucléaire. Ces motifs
peuvent être différenciés à l'aide des cellules en mitose
d'Immuno Concepts car la région chromosomique des
cellules mitotiques sera intensément colorée en cas de
motif périphérique mais ne sera pas colorée par les an-
ticorps anti-membrane nucléaire. Cette distinction est
importante d'un point de vue clinique car l'anticorps
anti-membrane nucléaire n'a pas de spécificité ADN/
DNP et n'est pas associé au LED (35).
Anticorps anti-centromères (ACA) vs. anticorps
mouchetés atypiques ressemblant au centromère:
Afin de vérifier l'anticorps anti-centromère, la région
chromosomique des cellules mitotiques doit être inten-
sément colorée avec des mouchetures discrètes. Si la
région chromosomique ne se colore pas, l'anticorps n'a
pas de spécificité kinétochore ni d'association avec
la variante CREST de la sclérodermie (36). Si la région
chromosomique ne se colore pas, l'anticorps n'est
pas anti-centromère et doit être noté comme étant «
moucheté atypique ».
FLUORESCENCES CYTOPLASMIQUES
Bien que les auto-anticorps anti-antigènes cytoplas-
miques soient rarement associés aux collagénoses, ils
peuvent être détectés à l'aide de substrats de culture
de cellules épithéliales (37). Les anticorps anti-mito-
chondries et anti-muscles lisses figurent parmi les deux
types d'anticorps les plus détectés et sont générale-
ment associés à une mononucléose infectieuse, à une
hépatite chronique active et à diverses pathologies
du foie (38- 39). Des anticorps anti-muscles lisses ont
également été décrits en utilisant un substrat de cellules
HEp-2 chez des patients qui ont des verrues (40).
Anticorps anti-mitochondries (AMA): Mouchetures
discrètes concentrées dans la région périnucléaire de
la cellule et dispersées en densité plus faible vers les
régions externes du cytoplasme. Cela doit être distin-
gué de l'anticorps dirigé contre l'appareil de Golgi,
qui ne colore généralement qu'un côté de la région
périnucléaire, ainsi que de l'anticorps anti-ribosome, qui
présente des mouchetures plus fines avec une appar-
ence en forme de brin correspondant à l'emplacement
du réticulum endoplasmique dans la cellule.
REMARQUE: Il est plus aisé de différencier les mouche-
tures périnucléaires de la fluorescence nucléaire
périphérique du fait que les mouchetures mitochondria-
les forment une fluorescence mouchetée interrompue
à l'extérieur de la membrane nucléaire, tandis que les
sérums périphériques forment une fluorescence lisse
uniforme à l'intérieur de la membrane nucléaire.
ENREGISTRER LES SERUMS COMME ETANT NEGATIFS AUX
ANTICORPS ANTI-NUCLEAIRES ET VERIFIER LA POSITIVITE
AUX ANTICORPS ANTI-MITOCHONDRIES SUR SUBSTRAT
NON-MITOTIC CELL (Interphase)
SPECIFIQUE AUX AMA.
Anticorps anti-muscles lisses (ASMA): Fin réseau de
très fines fibres fluorescentes traversant entièrement le
CELLULE NON MITOTIQUE
(Interphase)
12
Cytoplasm
Nuclear Membrane
Nucleoplasm
Nucleoli
Cytoplasme
Membrane Nucléaire
Nucléoplasme
Nucléoles
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