Werbung
Verfügbare Sprachen
Verfügbare Sprachen
MITOTISK CELL
(Metafas)
DNP och/eller histon (exempelvis Immuno Concepts
fläckiga positiva kontroll) uppvisar de mitotiska cellerna
ingen kromsomfärgning, och kan därför vara svåra att
upptäcka.
anVänDnIng aV mItotISka cEllEr
Urskiljning av fläckig respektive homogen antikropp:
Ett finfläckigt färgningsmönster är ibland svårt att skilja
från homogen färgning. Om mönstret är homogent är
de mitotiska cellernas kromosomer fast färgade. Om
mönstret är strikt fläckigt uppvisar området utanför
kromosomerna en fint fläckig reaktion.
OBSERVERA: Om hela den mitotiska cellen är finfläckig
samtidigt som kromosomområdet har en fast
färgning, är det högst troligt att det finns två eller flera
antikroppar. Rapportera screeningspädningen som
fläckig/homogen och titrera varje antikropp till dess
ändpunkt.
Perifer kontra nukleär membranantikropp: Antikropp
som uppvisar ett perifert mönster associeras i
allmänhet med DNA-/DNP-nukleära antigener. Höga
antikroppnivåer för dessa antikroppar tyder på SLE.
I substrat som inte inkluderar mitotiska celler kan
det perifera mönstret vara svårt att urskilja från en
nukleär membranantikropp. Genom att använda
Immuno Concepts mitotiska celler går det att urskilja
dessa mönster, eftersom de mitotiska cellernas
kromosomområde färgas intensivt i ett perifert mönster,
men inte färgas av en nukleär membranantikropp.
Skillnaden är kliniskt betydelsefull, eftersom nukleära
membranantikroppar inte har någon DNA-/DNP
specificitet och inte är associerade med SLE (35).
anti-cetromer antikropp (aca) kontra atypiskt färgad
antikropp som liknar en centromer: För att bekräfta
anticentromerantikroppen bör kromosomregionen i
de mitotiska cellerna färgas ljus med åtskiljda fläckar.
Om kromosomområdet inte färgas, har antikroppen
varken någon kinetochorspecificitet eller någon
association till sklerodermias CREST-variant (36). Om
kromosomområdet inte färgas, är antikroppen ingen
anticentromer och skall därför rapporteras som
"atypiskt fläckig".
cYtoPlaSmISk FluorEScEnS
Även om autoantikroppar mot cytoplasmiska antigener
inte vanligtvis associeras med bindvävssjukdom,
kan dessa antikroppar upptäckas genom epiteliala
cellstruktursubstrat (37). Mitokondriala och glatta
muskelantikroppar är de två antikroppar som vanligtvis
upptäcks och allmänt associeras med mononukleos,
kroniskt aktiv hepatit och leversjukdom (38-39).
Med hjälp av HEp-2-cellsubstratet har den glatta
muskelantikroppen även påvisats hos patienter med
vårtor (40).
antimitokondrial antikropp (ama): Åtskiljda fläckar
koncentrerade i cellens perinukleära område
och utvidgade i lägre densitet till cytoplasmans
yttre områden. Detta bör skiljas från anti-Golgi-
antikroppen, som i allmänhet endast färgar en sida
av det perinukleära området, och från antiribosomal
antikropp, som uppvisar finare fläckar med ett
nätformigt utseende som överensstämmer med platsen
för endoplasmisk reticulum i cellen.
OBSERVERA: Perinukleära fläckar kan enkelt
särskiljas från perifer nukleärfärgning genom att de
mitokondriska fläckarna bildar en avbruten fläckig
färgning runt utsidan på det nukleära membranet,
medan perifera sera bildar en fast och jämn färgning
inuti det nukleära membranet.
RAPPORTERA SERA SOM NEGATIVA FÖR ANTINUKLEÄRA
ANTIKROPPAR OCH BEKRÄFTA POSITIVT SVAR FÖR
ANTIMITOKONDRISK ANTIKROPP PÅ AMA-SPECIFIKT
SUBSTRAT.
antiglatt muskelantikropp (aSma): Mycket fin
fibrös färgning över hela cellcytoplasman med
Kromosomområde
Cytoplasma /
Nukleoplasma
ICKE-MITOTISK CELL
(Interfas)
ett spindelvävsliknande utseende. Till skillnad från
mitokondrisk antikropp är färgningen av glatt
muskelantikropp likformig över hela cytoplasman och
kan även sträcka sig över kärnan. Mitotiska celler
uppvisar i allmänhet stora, åtskiljda fläckar utanför
kromosomområdet. Glatta muskelantikroppar har visat
sig ha en hög specificitet för aktin (41-42).
RAPPORTERA SERA SOM NEGATIVA FÖR ANTINUKLEÄR
ANTIKROPP OCH BEKRÄFTA POSITIVT SVAR FÖR
ANTIGLATT MUSKELANTIKROPP PÅ ASMA-SPECIFIKT
SUBSTRAT.
tEStEtS BEgränSnIngar
1. Diagnos kan inte ställas enbart på grundval av
detektion av antinukleär antikropp. Läkaren måste
tolka dessa resultat tillsammans med patientens
historia och symptom, de fysiska upptäckterna och
övriga diagnostiska metoder.
2. Behandling bör inte påbörjas enbart på grundval
av ett positivt test för antinukleära antikroppar.
Hänsyn måste tas till kliniska symptom, andra labo-
ratorieupptäckter och läkarens kliniska intryck innan
eventuell behandling påbörjas.
3. Vissa läkemedel, bland annat procainamid och hy-
dralazin, kan medföra en lupus erytematos-liknande
sjukdom (43). Patienter med läkemedelsinducerad
LE kan uppvisa positiv homogen eller homogen/
perifer ANA, som i allmänhet är riktad mot nukleära
histoner (44).
4. En liten andel patienter med SLE uppvisar eventuellt
inte ANA genom indirekt immunofluorescens, men
kan uppvisa ANA med andra metoder (45).
5. Även om en högt titrerad ANA i hög grad kan tyda
på bindvävssjukdom, bör detta inte betraktas som
en diagnos, utan i stället ses som en del av patien-
tens totala sjukdomshistoria.
6. Färgningsmönster ändras ofta i och med fortlö-
pande titrering av sera. Detta beror i allmänhet på
förekomsten av mer än en nukleär antikropp.
7. Eftersom många alternativ finns att tillgå när det
gäller fluorescerande mikroskop, rekommenderas
att ljuskällor, filter och optik standardiseras när man
jämför patienternas antikroppnivåer mellan olika
laboratorier.
8. Positiva ANA föreligger även hos en liten pro-
centandel patienter med smittsamma och/eller
neoplastiska sjukdomar (9).
FörVäntaDE VärDEn
I ett stort medicincentrum på ett universitet framställdes
följande data över en tvåårsperiod med hjälp av HEp-
2-cell ANA-substrat. Tabell 1.
PrEStanDa
Immuno Concepts ANA-testsystem utvärderades
genom jämförelse med två andra fluorescerande
antikroppanalyser som är kommersiellt tillgängliga
(46). Studien omfattade 97 serumprover från normala
individer med bland annat följande diagnoser:
systemisk lupus erythematosus (SLE), blandad
bindvävssjukdom (MCTD), Raynauds progressiva
systemiska skleros-CREST-variant (PSS-CREST),
reumatoid artrit (RA), reumatoid artrit hos barn (JRA)
och andra bindvävssjukdomar. Sera testades med
de screeningspädningar som rekommenderades av
respektive tillverkare. Studieresultaten sammanfattas i
tabell 2.
De patienter som testades positivt i kategorin
"annan bindvävssjukdom" med Immuno Concepts
substrat hade temporär artrit (1), odifferentierad
bindvävssjukdom (1), polymyosit (2), monoartrit (3),
polyartrit (3) och andra sjukdomar som inte vidare
klassificerats.
Sjukhuskontroller som uppvisade positiv ANA
med Immuno Concepts substrat hade diabetes
36
Cytoplasma
Nukleärt Membran
Nukleoplasma
Nukleol
Werbung
