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antigeni nucleari come fibrillarina, RNA polimerasi
I, NOR 90 e PM/Scl.
Associazione con patologie: titoli alti prevalenti nella
sclerodermia e nella sindrome di Sjögren.(34)
centromero: un pattern a chiazze discreto fortemente
indicativo della sindrome CREST* variante della sclerosi
sistemica progressiva.(25) Le chiazze nucleari sono
molto discrete e in genere in qualche modo multiple
di 46 (in genere 23-46 chiazze per nucleo). Poiché i
centromeri sono restringimenti in cui le fibre del fuso si
fissano ai cromosomi, le cellule mitotiche mostreranno
la stessa reazione a chiazze nella regione cromoso-
mica.(12)
Sinonimi: ACA; a chiazze discrete.
Antigeni nucleari: centromero cromosomico (cineto-
coro).
Associazione con patologie: fortemente indicativo
della sindrome CREST* variante della sclerosi
sistemica progressiva.(25)
*CREST è una forma di PSS con calcinosi prominente,
fenomeno di Raynaud, disfunzione esofagea, sclero-
dattilia e teleangectasia.
cEllulE mItotIcHE
rIlEVamEnto
Le cellule mitotiche dovrebbero essere visibili su ogni
campo se visualizzate con ingrandimento 200X o
inferiore. Per verificare se una cellula è in mitosi, visualiz-
zare con ingrandimento 400X. Le cellule mitotiche
mostrano una caratteristica forma cellulare rotonda
senza alcuna membrana nucleare rilevabile. La regione
cromosomica delle cellule mitotiche in genere mostra
una forma irregolare all'interno della cellula dovuta
alla mancanza di membrana nucleare ed un estremo
restringimento dei cromosomi.
Sieri positivi per DNA e/o DNP e/o istone (come il
controllo positivo omogeneo IC) mostreranno una col-
orazione brillante della regione cromosomica di queste
cellule. In campioni negativi per DNA e/o DNP e/o
istone (come il controllo positivo a chiazze IC) le cellule
mitotiche non mostreranno una colorazione cromoso-
mica e saranno difficili da osservare.
uSo DEllE cEllulE mItotIcHE
Distinzione tra anticorpi a chiazze ed omogenei: il
pattern di colorazione a chiazze sottili è talvolta difficile
da differenziare da una colorazione omogenea. Se il
pattern è omogeneo ci sarà una colorazione uniforme
dei cromosomi delle cellule mitotiche. Se il pattern
è proprio a chiazze, la regione fuori dai cromosomi
mostrerà una sottile reazione a chiazze.
NOTA: se si presenta una chiazzatura sottile dell'intera
cellula mitotica con colorazione uniforme della regione
cromosomica, è molto probabile che siano presenti
MITOTIC CELL (Metaphase)
due o più anticorpi. Riportare la diluizione dello screen-
ing come a chiazze/omogenea e titolare ciascun
anticorpo al punto di equivalenza.
anticorpo della membrana periferica contro anticorpo
della membrana nucleare: un anticorpo che mostra un
pattern periferico che in genere si associa con antigeni
nucleari DNA/DNP. Titoli alti di questi anticorpi suggeris-
cono SLE. In substrati che non comprendono cellule
mitotiche, il pattern periferico può essere difficile da
distinguere dall'anticorpo della membrana nucleare.
Usando le cellule mitotiche della Immuno Concepts,
questi pattern possono essere differenziati, perché la
regione cromosomica delle cellule mitotiche verrà
colorata intensamente in un pattern periferico senza
però essere colorata dall'anticorpo della membrana
CELLULE MITOTIQUE
nucleare. Questa distinzione è clinicamente importante
perché l'anticorpo della membrana nucleare non ha
(Métaphase)
specificità DNA/DNP e non è associata all'SLE.(35)
CELLULA MITOTICA
(Metafase)
Chromosome Region
Cytoplasm/
Nucleoplasm
Région chromosomique
Cytoplasme /
Nucléoplasme
La Zona Cromosomica
Citoplasma /
Nucleoplasma
anticorpo anti-centromero (aca) contro anticorpo
atipico a chiazze somigliante al centromero: per verifi-
care l'anticorpo anti-centromero la regione cromoso-
mica delle cellule mitotiche dovrebbe avere un colore
brillante con chiazze discrete. Se la regione cromoso-
mica non si colora, l'anticorpo non ha né specificità
cinetocoro né associazione con la variante CREST della
sclerodermia.(36) Se la regione cromosomica non si
colora, l'anticorpo non è anti-centromero e va riportato
come "a chiazze atipico".
FluorEScEnza cItoPlaSmatIca
Sebbene gli anticorpi degli antigeni citoplasmatici non
siano comunemente associati a patologie del tessuto
connettivo, questi anticorpi possono essere rilevati
usando substrati di coltura di cellule epiteliali.(37) Gli an-
ticorpi mitocondriali e del muscolo liscio sono i due anti-
corpi rilevati più di frequente e sono in genere associati
a mononucleosi, epatite cronica attiva e patologie al
fegato.(38- 39) Usando il substrato cellulare HEp-2, è
stato anche dimostrato l'anticorpo del muscolo liscio in
pazienti con verruche.(40)
anticorpo anti-mitocondriale (ama): chiazze discrete
concentrate nella regione perinucleare della cellula ed
estese in bassa densità nelle regioni esterne del cito-
plasma. Vanno distinte dall'anticorpo anti-Golgi, che in
genere colora solo un lato della regione perinucleare e
dall'anticorpo anti-ribosomico che mostra chiazze più
sottili con un aspetto filiforme in linea con la posizione
del reticolo endoplasmatico all'interno della cellula.
nota: le chiazze perinucleari possono essere molto
facilmente distinguibili dalla colorazione nucleare
periferica notando che le chiazze mitocondriali
formano una colorazione a chiazze ininterrotta intorno
alla parte esterna della membrana nucleare mentre i
sieri periferici formano una colorazione uniforme e liscia
all'interno della membrana nucleare.
RIPORTARE I SIERI COME NEGATIVI PER GLI ANTICORPI
ANTINUCLEARI E VERIFICARE I POSITIVI PER L'ANTICORPO
ANTIMITOCONDRIALE SU SPECIFICO SUBSTRATO AMA.
anticorpo anti-muscolo liscio (aSma): colorazione fibro-
sa molto sottile sull'intero citoplasma delle cellule con
aspetto a "tela di ragno". A differenza dell'anticorpo
mitocondriale, la colorazione dell'anticorpo del mus-
colo liscio è uniforme in tutto il citoplasma e può anche
estendersi al di sopra del nucleo. Le cellule mitotiche
in genere mostrano grandi chiazze discrete al di fuori
della regione cromosomica. È stato dimostrato che
l'anticorpo del muscolo liscio ha un'alta specificità
all'actina.(41-42)
RIPORTARE I SIERI COME NEGATIVI PER L'ANTICORPO AN-
TINUCLEARE E VERIFICARE I POSITIVI PER L'ANTICORPO
ANTIMUSCOLO LISCIO SU SPECIFICO SUBSTRATO ASMA.
NON-MITOTIC CELL (Interphase)
lImItI DEl tESt
1. Le diagnosi non possono essere fatte solo sulla base
del rilevamento dell'anticorpo antinucleare. Il med-
ico deve interpretare questi risultati confrontandoli
con l'anamnesi e i sintomi del paziente, i dati fisici e
altre procedure diagnostiche.
2. La cura non va iniziata sulla sola base di un test pos-
itivo per gli anticorpi antinucleari. Prima di iniziare
qualunque trattamento devono essere considerate
indicazioni cliniche, altri risultati di laboratorio e
l'impressione clinica del medico.
3. Certi farmaci, tra cui la procainamide e la
idralazina, possono indurre una patologia del tipo
lupus eritematoso.(43) Pazienti con LE indotto da
farmaci possono mostrare ANA positivi omogenei o
CELLULE NON MITOTIQUE
omogenei/periferici comunemente diretti contro gli
istoni nucleari.(44)
(Interphase)
4. Una piccola percentuale di pazienti con SLE può
non dimostrare degli ANA per mezzo di immuno-
CELLULA NON IN MITOSI
(Interfase)
18
Cytoplasm
Nuclear Membrane
Nucleoplasm
Nucleoli
Cytoplasme
Membrane Nucléaire
Nucléoplasme
Nucléoles
Citoplasma
Membrana Nucleare
Nucleoplasma
Nucleoli
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