Werbung
Verfügbare Sprachen
Verfügbare Sprachen
YttErlIgarE matErIal Som BEHöVS
(mEDFölJEr EJ)
Volymetriska pipetter för pipettering av 20-25 µl
volymer
Coplin-kärl eller färgningsskålar
Klämflaska eller Pasteur-pipetter
Serologiska pipetter
Enliters behållare (för PBS-buffert)
Avjoniserat eller destillerat vatten
Provrör för att framställa serumspädningar
Läskpapper eller pappershanddukar
Inkubationskammare
Engångshandskar av latex
Laboratorietidur
Fluorescerande mikroskop utrustat med 495 nm
matarfilter och 515 nm spärrfilter
FörSIktIgHEtSåtgärDEr
1. Allt material av mänskligt ursprung som använts
i den här produkten har testats med FDA-god-
kända metoderoch visat sig vara negativt (inte
upprepande reaktivt) för antikroppar mot humant
immunbristvirus-1 (HIV-1), humant immunbristvi-
rus-2 (HIV-2), hepatit C-virus (HCV) och hepatit B
ytantigen (HBsAg) . Ingen testmetod kan emellertid
helt garantera att det inte förekommer HIV-1,
HIV-2, hepatit-C, hepatit-B eller andra smittämnen.
Därför bör allt satsmaterial hanteras som potentiellt
smittsamt.
2. Alla patientprover på biosäkerhetsnivå 2 bör
hanteras enligt rekommendationerna för potentiellt
smittsamt humanserum eller blodprov i manu-
alen från Centrum för Sjukdomskontroll/Nationella
hälsoinstitut: Biosäkerhet i mikrobiologiska och
biomedicinska laboratorier, 1984 års upplaga.
3. Spädning av komponenter eller byte till andra kom-
ponenter än de som medföljer detta system kan ge
motsägande resultat.
4. Natriumazid används som konserveringsmedel.
Natriumazid kan reagera med bly- eller kopparled-
ningar och bilda explosiva metallazidsalter. När
reagenser kasseras, skall man spola med rikliga
mängder kranvatten för att avlägsna eventuella
rester från avloppsledningarna. Natriumazid är ett
gift och kan vara toxiskt vid förtäring.
5. Satsen är avsedd för in vitro-diagnostiskt bruk.
6. Om hemolyserat eller lipemiskt sera måste använ-
das skall inaktiverat sera värmas i 30 minuter i 56° C
för optimala resultat. Mikrobiellt kontaminerat sera
skall inte användas.
7. Det har visats att felaktigt positiv ANA kan inträffa
på grund av C1q-bindning till DNA, oavsett vilket
substrat som används (30). För att eliminera
eventuell C1q-störning skall inaktiverat patientsera
rutinmässigt värmas i 56° C under 30 minuter före
analysen.
8. Det titrerbara kontrollserumet är avsett för använ-
dning vid övervakning av reproducerbarheten
mellan olika loter eller serier. Det är inte avsett för
mätning av den totala sensitiviteten eller analysens
specificitet.
9. Undvik att röka, äta eller dricka i områden där
prover eller satsreagenser hanteras.
10. Undvik alltid stänk eller alstring av aerosoler.
11. Andra inkubationstider och temperaturer än de
angivna kan ge felaktiga resultat.
12. Korskontamination mellan reagenser och prover
kan ge felaktiga resultat.
13. Återanvändningsbart glas måste tvättas och sköljas
noggrant före användning. Allt glas måste rengöras
och torkas före användning.
14. Placera alla reagenser, objektglas och prover i
rumstemperatur (18-24° C) före användning.
15. Använd engångshandskar av latex vid hantering
av prov och reagenser, och tvätta händerna nog-
grant efteråt.
16. Mikrobiell kontamination av reagenser eller prover
kan ge felaktiga resultat.
17. Pipettera aldrig med munnen och undvik att
komma i kontakt med reagenser och prov med
hud eller slemhinnor. Tvätta med bakteriedödande
tvål och rikligt med vatten om sådan kontakt inträf-
fat.
ProVtagnIng
Provtagning: Serum rekommenderas som prov. Cirka 5
ml helblod skall tas aseptiskt genom venpunktion med
hjälp av ett sterilt vakuumblodtagningsrör eller annat
lämpligt blodtagningssystem. Låt blodet koagulera i
rumstemperatur (18-24° C). Serum skall så snart som
möjligt separeras från koagler genom centrifugering för
att minimera hemolys.
Störande ämnen: Sera som uppvisar en hög grad av
hemolys, ikterus, lipemi eller mikrobiell tillväxt bör inte
användas, eftersom dessa betingelser kan leda till
avvikande resultat. Prover som innehåller synliga av
partiklar bör klargöras genom centrifugering före analys.
Förvaring: Sera kan förvaras i 2-10°C under max en
vecka. Om analysen dröjer ytterligare skall sera frysas i -
20°C eller lägre. Sera bör inte förvaras i självavfrostande
kylskåp eller fryslagerrum.
VarnIng: Upprepad frysning/upptining av patientprov
kan ge felaktigt positiva eller negativa resultat.
tolknIng aV rESultat
kValItEtSkontroll
Positiva, negativa och PBS-kontroller bör köras i de
brunnar som finns för kvalitetskontroll på objektglasen.
Den positiva kontrollen bör uppvisa ljust äppelgrön
fluorescens i cellkärnorna, med ett klart urskiljningsbart
mönster som är karaktäristiskt för det kontrollserum som
används. Den negativa kontrollen bör uppvisa låg
intensitet och en ospecifik matt grön fluorescens i både
cytoplasman och kärnan, men utan ett urskiljningsbart
mönster av nukleär färgning. PBS-kontrollen används för
att observera ospecifik färgning av antikroppreagensen
och bör inte uppvisa någon grön fluorescens. Om
kontrollerna inte ser ut enligt beskrivningarna är testet
ogiltigt och bör göras om.
tIllHöranDE tItrErBar kontroll
Vid avläsning av antikroppnivåer börjar många
laboratorier med att läsa den brunn som innehåller
det mest spädda provet och läser "baklänges" till
spädningen 1:40. Antikroppnivåns ändpunkt är den
första brunn i vilken ett klart urskiljningsbart nukleärt
färgningsmönster är synligt. Vi rekommenderar denna
metod för att fastställa antikroppsnivåns ändpunkter.
Antikroppnivåns medelvärde och spridningsområde
(± en spädning på var sida om medelvärdet) som
fastställts för detta lotnummer fastställdes i vårt
laboratorium och uppges för vägledning. Kontrollen
tillhandahålls för att varje laboratorium skall ha tillgång
till ANA-testningens reproducerbarhet (precision).
Eftersom kontrollen inte är avsedd som indikator på
antikroppnivåns precision, bör varje laboratorium
fastställa sitt eget medelvärde för antikroppnivåns
ändpunkt för provet i fråga och använda denna
information för att få tillgång till reproducerbarheten
(precisionen) mellan olika serier.
Genom upprepade analyser av denna
titrerbara kontroll, med användning av Immuno
Concepts fluorescerande ANA-testsystem har ett
medelantikroppvärde fastställts för varje lotnummer.
Lotnumret och antikroppnivåns medelvärde och
spridningsområde (± en dubbel spädning på var sida
om medelvärdet) står angivna på ampullens etikett,
och bör användas som vägledning för testsystemets
prestanda.
Det är viktigt att inte blanda ihop fluorescensens
intensitet med eventuell förekomst av antinukleära
antikroppar. Den viktigaste faktorn när man fastställer
om en given serumspädning är positiv eller inte är om
det finns ett klart urskiljningsbart mönster, oavsett den
fluorescerande färgningens intensitet.
Denna titrerbara kontroll uppvisar det typiska fläckiga
mönster som är associerat med RNP-antikroppen.
Det kan även finnas ett andra mönster av NSp I (flera
diskreta fläckar i interfascellernas kärna), men detta är
det typiska RNP-fläckmönster som skall användas för att
läsa ändpunkter.
De värden som erhållits i vårt laboratorium kan skilja sig
från era. Faktorer som kan påverka resultaten omfattar,
men är inte begränsat till:
1. Vilken typ av ljuskälla som används. Ljuskällor av
kvicksilver ger högre exciteringsenergi vid 495 nm
än kvarts/halogen. Ljuskällor av kvicksilver på 50
watt, 100 watt och 200 watt skiljer sig något i ex-
citeringsenergi vid 495 nm. Kvarts-/halogenljuskällor
på 100 watt ger högre exciteringsenergi vid 495 nm
än kvarts-/halogenljuskällor på 50 watt.
2. Ljuskällans skick och ålder. Detta gäller framför allt
ljuskällor av kvicksilver som i allmänhet uppvisar en
gradvis minskning i exciteringsenergi vid 495 nm,
innan de smälter ned. Denna gradvisa minskning i
exciteringsenergi kan leda till en avsevärd förlust i
känslighet över flera veckors tid. Problemet kan un-
dvikas genom att föra en tidsloggbok. För bästa re-
34
Werbung
