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no lo hace.
Antígenos nucleares: Sm; RNP; Scl-70; SSA; SSB; y
otros sistemas de antígenos/anticuerpos aún no
caracterizados.
Asociación a enfermedades: Los títulos elevados sug-
ieren LES (antígeno Sm), enfermedades mixtas del
tejido conjuntivo (antígeno RNP), esclerodermia
(antígeno Scl-70) o síndrome de Sjögren-complejo
seco (antígeno SSA o SSB). Los títulos bajos sugie-
ren otras enfermedades del tejido conjuntivo (33).
nucleolar: Tinción moteada grosera de grandes
dimensiones, generalmente menos de 6 manchas por
célula, con o sin manchas finas ocasionales, entre 5 y
10. La región no cromosómica de las células mitóticas
en metafase se tiñe mucho, mientras que la región
cromosómica lo hace débilmente. Las células en
anafase y en telofase pueden teñirse de forma similar a
como lo hacen los núcleos en interfase.
Antígenos nucleares: Se suelen denominar ARN 4-6s,
y otros antígenos nucleares como fibrilarina,
polimerasa I de ARN, NOR 90 y PM/Sc1.
Asociación a enfermedades: Los títulos elevados
prevalecen en la esclerodermia y el síndrome de
Sjögren (34).
centrómero: Un patrón de tinción discretamente
moteado es muy sugerente de la variante de la
esclerosis sistémica progresiva que se conoce como
síndrome CREST* (25). Las manchas nucleares son
muy discretas y su número suele ser múltiplo de 46
(habitualmente 23-46 manchas por núcleo). Dado
que los centrómeros son constricciones en las que la
fibras fusiformes se unen a los cromosomas, las células
mitóticas mostrarán la misma reacción de moteado en
la región cromosómica (12).
Sinónimos: ACA; moteado discreto.
Antígenos nucleares: Centrómero cromosómico
(cinetocoro).
Asociación a enfermedades: Muy sugerentes de la
variante de la esclerosis sistémica progresiva que
se conoce como síndrome CREST* (25).
*CREST es una forma de ESP con calcinosis importante,
fenómeno de Raynaud, disfunción esofágica,
MITOTIC CELL (Metaphase)
esclerodactilia y telangiectasias.
cÉlulaS mItótIcaS
DEtEccIón
Las células mitóticas deben ser visibles en todos los
campos con una ampliación de 200X o inferior. Para
comprobar si una célula se encuentra en mitosis debe
utilizarse la ampliación de 400X. Las células mitóticas
muestran una forma redondeada característica, sin
membrana nuclear detectable. Por lo general, la
región cromosómica de las células mitóticas muestra
una forma irregular en el seno de la célula debido a
la ausencia de membrana nuclear, y una extrema
constricción de los cromosomas.
CELLULE MITOTIQUE
Los sueros positivos para ADN y/o DNP y/o histona
(Métaphase)
(como el control positivo homogéneo de IC)
presentarán una tinción brillante de la región
cromosómica de estas células. En las muestras
negativas para ADN y/o DNP y/o histona (como el
control positivo homogéneo de IC), los cromosomas de
las células mitóticas no se teñirán y será difícil verlos.
uSo DE cÉlulaS mItótIcaS
Distinción entre anticuerpos moteados y homogéneos:
En ocasiones es difícil distinguir un patrón de tinción
moteado fino de otro homogéneo. Si el patrón
es homogéneo, habrá una tinción sólida de los
cromosomas de las células mitóticas. Si el patrón es
CELLULA MITOTICA
estrictamente moteado, la región situada fuera de los
cromosomas presentará una reacción de moteado
(Metafase)
fino.
nota: Si se presenta un moteado fino de toda la
CÉLULA MITÓTICA
(Metafase)
Chromosome Region
Cytoplasm/
Nucleoplasm
Région chromosomique
Cytoplasme /
Nucléoplasme
La Zona Cromosomica
Citoplasma /
Nucleoplasma
Región Cromosómica
Citoplasma /
Nucleoplasma
célula mitótica junto con la tinción sólida de la región
cromosómica, es muy probable que haya dos o más
anticuerpos. Designe la dilución de selección como
moteada/homogénea, y titule cada anticuerpo hasta
el criterio de valoración.
Anticuerpo periférico frente a anticuerpo contra la
membrana nuclear: En general, los anticuerpos que
muestran un patrón periférico se asocian a antígenos
nucleares de ADN/DNP. Los títulos elevados de estos
anticuerpos sugieren LES. En sustratos que no incluyen
células mitóticas puede ser difícil distinguir el patrón
periférico del de los anticuerpos contra la membrana
nuclear. Con las células mitóticas de Immuno
Concepts es posible distinguir estos patrones, pues la
región cromosómica de las células mitóticas se teñirá
intensamente con un patrón periférico, pero no será
teñida por el anticuerpo contra la membrana nuclear.
Esta distinción es importante desde el punto de vista
clínico, pues los anticuerpos contra la membrana
nuclear carecen de especificidad ADN/DNP y no se
asocian al LES (35).
Anticuerpo anticentrómero (ACA) frente a centrómero
atípico con aspecto de anticuerpo moteado: Para
verificar la presencia de ACA, la región cromosómica
de las células mitóticas debe teñirse brillantemente
con manchas discretas. Si la región cromosómica no
se tiñe, es que el anticuerpo carece de especificidad
por el cinetocoro y no se asocia a la variante CREST de
la esclerodermia (36). Si la región cromosómica no se
tiñe, el anticuerpo no es ACA y debe designarse como
"moteado atípico".
FluorEScEncIa cItoPláSmIca
Aunque los anticuerpos contra antígenos citoplásmicos
no suelen asociarse a enfermedades del tejido
conjuntivo, se pueden detectar con sustratos de
cultivos de células epiteliales (37). Los anticuerpos
que se detectan con más frecuencia son los dirigidos
contra las mitocondrias y el músculo liso; suelen
asociarse a la mononucleosis, la hepatitis activa
crónica y las hepatopatías (38 - 39). Con el sustrato de
células HEp-2 también se han demostrado anticuerpos
NON-MITOTIC CELL (Interphase)
contra el músculo liso en pacientes con verrugas (40).
anticuerpos anti-mitocondriales (ama): Manchas
discretas, concentradas en la región perinuclear de la
célula y que se extienden, con menor intensidad, a las
regiones exteriores del citoplasma. Hay que distinguirlo
de los anticuerpos anti-Golgi, que suelen teñir sólo
un lado de la región perinuclear, y de los anticuerpos
anti-ribosomas, que muestran manchas más finas con
aspecto filamentoso compatible con la localización del
retículo endoplásmico en el interior de la célula.
NOTA: La forma más fácil de distinguir las manchas
perinucleares de la tinción periférica del núcleo
consiste en observar que las manchas mitocondriales
forman una tinción moteada discontinua en torno al
exterior de la membrana nuclear, mientas que en los
CELLULE NON MITOTIQUE
sueros periféricos se forma una tinción lisa sólida en el
interior de la membrana nuclear.
(Interphase)
DESIGNE LOS SUEROS COMO NEGATIVOS PARA
ANTICUERPOS ANTINUCLEARES, Y VERIFIQUE LA
PRESENCIA DE ANTICUERPOS ANTIMITOCONDRIALES EN
EL SUSTRATO ESPECÍFICO CORRESPONDIENTE.
anticuerpos anti-músculo liso (aSma): Tinción fibrosa
muy fina en todo el citoplasma, con aspecto de
tela de araña. Al contrario que los anticuerpos
antimitocondriales, la tinción de los anticuerpos
anti-músculo liso es uniforme en todo el citoplasma,
y puede llegar al núcleo. Por lo general, las células
mitóticas muestran grandes manchas discretas en el
exterior de la región cromosómica. Se ha demostrado
CELLULA NON IN MITOSI
que los anticuerpos anti-músculo liso son muy
específicos de la actina (41-42).
(Interfase)
DESIGNE LOS SUEROS COMO NEGATIVOS PARA
ANTICUERPOS ANTINUCLEARES, Y VERIFIQUE LA
CÉLULA NO MITÓTICA
(Interfase)
24
Cytoplasm
Nuclear Membrane
Nucleoplasm
Nucleoli
Cytoplasme
Membrane Nucléaire
Nucléoplasme
Nucléoles
Citoplasma
Membrana Nucleare
Nucleoplasma
Nucleoli
Citoplasma
Membrana Nuclear
Núcleo
Nucleólos
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