Agilent Technologies 1290 Infinity Systemhandbuch Und Kurzanleitung Seite 63

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Optimieren des Agilent 1290 Infinity LC Systems
Erzielen einer höheren Empfindlichkeit
Detektor ist bei vielen Applikationen linear bis zu 2 AU und darüber hinaus.
Dies bietet einen großen linearen Bereich für die Konzentration. Bei einer
Analyse mit hohen Konzentrationen kann der lineare Konzentrationsbereich
erweitert werden, indem die Wellenlänge auf einen Wert mit einer geringeren
Extinktion festgelegt wird, z. B. auf das Wellenlängenminimum, oder indem
eine größere Bandbreite verwendet wird, die in der Regel geringere Extinkti-
onswerte umfasst. Die Verwendung von Wellenlängenmaxima und -minima zur
Quantifizierung geht auf herkömmliche UV-Detektoren zurück, die aufgrund
mechanischer Toleranzen beim Verschieben von Gittern steil ansteigende und
abfallende Flanken des Spektrums vermeiden mussten. Bei Diodenar-
ray-Detektoren gibt es diese Einschränkungen nicht, aber aus konventionellen
Gründen werden Maxima und Minima gegenüber anderen Bereichen des Spek-
trums bevorzugt verwendet.
Die Referenzbandbreite wird normalerweise in einem Bereich des UV-Spek-
trums festgelegt, in dem die Substanz keine Extinktion aufweist. Dies wird
anhand des Spektrums für Anissäure in Abbildung 23 auf Seite 64 dargestellt.
Dieses Spektrum ist typisch für viele kleine Moleküle, die ein UV-Chromophor
enthalten. Zur Erzielung optimaler Ergebnisse wurde die Referenz als breite
Bande so nah wie möglich an der Signalwellenlänge, jedoch in einem Bereich
mit keiner Extinktion festgelegt. Referenzbandbreiten von 60 nm bis 100 nm
werden häufig verwendet. Die Standardreferenz beträgt 360 nm mit einer
Bandbreite von 100 nm. Es wird eine große Bandbreite verwendet, da dies das
Rauschen im Referenzsignal reduziert (in der statistischen Theorie wird der
Fehler, in diesem Fall also das Rauschen, um die Quadratwurzel aus der
Anzahl der Determinationen reduziert). Es ist wichtig, dass die Referenzband-
breite nicht in einen Bereich des Spektrums hineinreicht, der eine gewisse
Extinktion aufweist, da dies das Ergebnissignal und die Empfindlichkeit redu-
zieren würde. Die Verwendung einer Referenzwellenlänge kann dabei helfen,
die Drift oder Versetzung im Chromatogramm zu reduzieren, die durch
Brechungsindexänderungen infolge von Raumtemperaturschwankungen oder
Gradientenbetrieb entsteht. Der Effekt eines Referenzsignals kann einfach
getestet werden, indem zwei identische Signale festgelegt werden, eines mit
und eines ohne Referenzsignal. Wenn es keinen Bereich des Spektrums ohne
Extinktion gibt, ist es besser, kein Referenzsignal zu verwenden.
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