Agilent Technologies 1290 Infinity Benutzerhandbuch Seite 79

5
Optimierung der Leistung des Moduls
Höhere Auflösung erzielen
Bei isokratischen Trennungen führt die Erhöhung des Retentionsfaktors k zu
einer besseren Auflösung, da der gelöste Stoff länger festgehalten wird. Bei
*
Gradiententrennungen wird die Retention durch k in der folgenden Gleichung
beschrieben:
wobei:
*
• k
= mittlerer k-Wert,
• t
= Dauer des Gradienten (oder Gradientensegments) (min),
G
• F = Fluss (ml/min),
• V
= Säulenverzögerungsvolumen,
m
• %B = Änderung der Fraktion von Lösungsmittel B während des Gradien-
ten,
• S = konstant (ca. 4-5 für kleine Moleküle).
Dies zeigt, dass k und damit die Auflösung durch flachere Gradienten (Ände-
rung von 2 bis 5 %/min als Richtlinie), eine höhere Flussrate und ein geringe-
res Säulenvolumen erhöht werden können. Diese Gleichung zeigt auch, wie ein
vorhandener Gradient beschleunigt werden kann. Wenn der Fluss verdoppelt,
*
aber die Gradientendauer halbiert wird, bleibt k konstant und die Trennung
sieht gleich aus, erfolgt jedoch in der Hälfte der Zeit. Kürzlich veröffentlichte
Forschungsergebnisse haben gezeigt, wie eine kürzere STM-Säule aufgrund
einer höheren Geschwindigkeit (bei Temperaturen über 40 °C) eine höhere
Peakkapazität als eine längere STM-Säule erzeugen kann. (Siehe Petersson et
al., J.Sep.Sci, 31, 2346-2357, 2008, Maximizing peak capacity and separation
speed in liquid chromatography).
Benutzerhandbuch für die quaternäre Pumpe 1290 Infinity 79