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8. Verdünnen Sie die Sequenzierungs-Primer auf 0,3 µM in
9. Setzen Sie die PCR-Platte (oder -Streifen) unmittelbar im
10. Legen Sie Unterdruck an den Saugkopf an, indem Sie
11. Senken Sie die Filter-Hohlnadeln vorsichtig in die Wells
12. Vergewissern Sie sich, dass die Flüssigkeit aus allen Wells
PyroMark Q24 MDx Handbuch 01/2016
Annealing-Puffer. Pipettieren Sie 25 µl der Lösung in
jedes Well einer PyroMark Q24 Platte, das verwendet
wird.
Hinweis: Benutzen Sie einen der PyroMark Q24 Platten-
Halter als Halter bei der Vorbereitung und zum
Transportieren der Platte.
Anschluss an die Immobilisierung (siehe Abschnitt 5.3.3)
und die PyroMark Q24 Platte auf die Arbeitsplattform.
Stellen Sie sicher, dass die Platte genauso ausgerichtet ist
wie bei der Beschickung mit den Proben (siehe Abb.
unten).
den Vakuumschalter öffnen.
der PCR-Platte (oder -Streifen), um die Beads mit der
immobilisierten Template-DNA anzusaugen. Halten Sie
die Filter-Hohlnadeln für 15 s in Position. Seien Sie
vorsichtig, wenn Sie den Saugkopf anheben.
Hinweis: Sepharose-Beads sedimentieren relativ schnell.
Falls über 1 Min. seit dem Schütteln der Platte (oder der
-Streifen) vergangen ist, schütteln Sie sie erneut für 1 Min.,
bevor Sie die Beads ansaugen.
vollständig abgesaugt ist und alle Beads auf den Spitzen
der Filter-Hohlnadeln zurückgehalten wurden.
Hinweis: Falls sich noch Reste der Flüssigkeiten oder
weiße Beads in den Wells befinden, müssen die Filter-
Hohlnadeln eventuell ersetzt werden (siehe
Abschnitt 6.3.2).
Allgemeiner Betriebsablauf
5-17
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