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Anhang B
Ausgangs-Template
Die Ausbeute und Qualität des PCR-Produkts wird von der
Qualität und der Mange der als Ausgangs-Template verwen-
deten Nukleinsäure beeinflusst. Dies gilt insbesondere bei
der Amplifikation langer DNA-Abschnitte, die durch die
Bisulfitbehandlung fragmentiert oder aus paraffineinge-
bettetem Material extrahiert wurden.
Qualität der Ausgangs-Template
Weil die PCR aus mehreren Zyklen enzymatischer Reaktion
besteht, ist sie empfindlicher gegenüber Verunreinigungen
wie Proteinen, Phenol/Chloroform, Salzen, Ethanol, EDTA
und anderen Lösungsmitteln als enzymkatalysierte Prozesse,
die in einem Schritt ablaufen. QIAGEN bietet ein komplettes
Sortiment an Systemen für die Nukleinsäure-Präparation, die
qualitativ hochwertige Templates für die PCR sicherstellen.
Dazu gehören das QIAprep
®
System für die schnelle
Plasmid-Reinigung, die QIAamp
®
und DNeasy
®
Systeme für
die schnelle Reinigung von genomischer DNA und viralen
Nukleinsäuren sowie das RNeasy
®
System für die RNA-
Präparation aus einer Vielzahl von Ausgangsmaterialien.
Weitere Informationen über die QIAprep, QIAamp, DNeasy
und RNeasy Produkte erhalten Sie von unserem Technischen
Service (siehe hintere Umschlagseite dieses Handbuchs) oder
finden Sie auf unserer Website www.qiagen.com.
Qualität der Ausgangs-Template bei Durchführung
von CpG-Assays
Kritische Parameter für eine erfolgreiche PCR, bei der
bisulfitbehandelte DNA-Templates verwendet werden, sind
die vollständige Umwandlung durch das Bisulfit und eine
ausreichende Länge der DNA-Fragmente für die PCR. Der
EpiTect
®
Bisulfite Kit bietet ein schnelles und zuverlässiges
Verfahren für die effiziente Umwandlung mit Bisulfit und
einen einzigartigen DNA-Schutzpuffer, den DNA Protect
Buffer, der die DNA-Fragmentation während der Bisulfit-
Umwandlungsreaktion verhindert. Weitere Informationen
über die EpiTect Produkte erhalten Sie von unserem
Technischen Service (siehe hintere Umschlagseite dieses
PyroMark Q24 MDx Handbuch 01/2016
B-3
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