Procedimento Do Ensaio - peviva M30 Apoptosense ELISA Gebrauchsanweisung

Instruções de utilização

Procedimento do Ensaio

O M30 Apoptosense ELISA deve ser realizado à temperatura ambiente (24 ± 3 °C).
1. Permita que os reagentes atinjam a temperatura ambiente antes de iniciar o
ensaio. Vortex todos os reagentes antes de utilizar.
2. Dissolva a pastilha de lavagem com água desionizada (veja "preparação de
componentes")
3. Dilua o M30 Conjugate com M30 Conjugate Dilution Buffer.
4. Pipete 25 µl de M30 Standard (A – G), M30 Control Low, M30 Control High ou
amostras nos respectivos poços (duplicados são recomendados).
5. Adicione 75 µl de solução diluída de conjugado M30 a cada poço.
Nota!
Os passos 4 e 5 devem ser executados sequencialmente sem interrupção
em 20 min.
6. Tape os poços com Sealing Tape.
7. Incube durante 4 horas com agitação a 600 rpm.
8. Lave a microplaca num lavador 5 vezes com 400 – 500 µl/poço de solução
de lavagem
ou
Lave manualmente 5 vezes com 250 µl de solução de lavagem. Evite con-
taminação entre os poços.
9. Adicione 200 µl de TMB Substrate a cada poço. Incube durante 20 ± 1 minu-
tos no escuro à temperatura ambiente.
10. Adicione 50 µl de Stop Solution a cada poço. Misture completamente
a solução TMB Substrate e a Stop Solution, agite a microplaca durante
5 – 10 segundos.
11. Deixe repousar durante 5 minutos antes de ler as absorvâncias.
12. Determine as Abs a 450 nm num leitor de microplacas nos 30 min seguintes
e guarde os resultados.
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