Testprocedur - peviva M30 Apoptosense ELISA Gebrauchsanweisung

Bruksanvisning

Testprocedur

M30 Apoptosense ELISA ska utföras vid rumstemperatur (24 ± 3 °C).
1. Rumstemperera alla komponenter och prover före testsättning. Vortexa före
användning.
2. Lös upp Wash Tablet med färskt avjoniserat vatten (se avsnitt "Spädning av
komponenter").
3. Späd M30 Conjugate med M30 Conjugate Dilution Buffer och blanda or-
dentligt (se avsnitt "Spädning av komponenter").
4. Pipettera 25 µl M30 Standard (A–G), M30 Control Low, M30 Control High
eller prover per brunn (duplikat rekommenderas).
5. Tillsätt 75 µl av spädd M30 Conjugate-lösning till varje brunn.
OBS! Steg 4 och 5 ska utföras utan avbrott inom 20 minuter.
6. Täck brunnarna med Sealing Tape eller med ett lock för mikrotiterplattor.
7. Inkubera på skak i 4 timmar. Skakhastighet: 600 varv/min.
8. Tvätta plattan i en plattvätt, 5 tvättcykler om 400–500 µl/brunn ("over-
flow"-tvätt)
eller
Tvätta plattan manuellt: töm och tvätta plattan 5 gånger med 250 µl upplöst
Wash Tablet-lösning. Undvik kontamination mellan brunnarna.
9. Tillsätt 200 µl TMB Substrate i alla brunnar. Inkubera i mörker vid rums-
temperatur i 20 ± 1 minuter.
10. Tillsätt 50 µl Stop Solution till alla brunnar. Skaka mikrotiterplattan i
5–10 sekunder för att säkerställa att TMB Substrate och Stop Solution
är väl blandade. Låt mikrotiterplattan stå i 5 minuter innan avläsning av
absorbans.
11. Mät absorbansen i en plattläsare vid 450 nm inom 30 minuter.
12. Beräkna resultaten enligt beskrivning under stycket "Beräkning av
resultaten".
Sida 24