Descrição Do Ensaio; Finalidade; Sumário E Explicação Do Teste; Príncipio Do Método - peviva M30 Apoptosense ELISA Gebrauchsanweisung

Descrição do Ensaio

Finalidade

O kit M30 Apoptosense ELISA é imunoensaio para a determinação quantitativa
da apoptose – associada à "caspase-cleaved" keratin 18 (ccK18, K18Asp396 ou
M30 neo-epitopo), no soro e no plasma.
Sumário e explicação do teste
As caspases fazem a clivagem de várias proteínas celulares durante a apoptose.
Nas células epiteliais, um dos substratos é um filamento intermediário da
proteína citoqueratina 18 (K18). O anticorpo M30 reconhece o neo-epitopo
exposto após a clivagem pela caspase do K18, depois do resíduo 396 do ácido
aspártico (ref. 1). A clivagem nesta posição ocorre durante a apoptose através
da caspase 9 e durante a fase de activação da caspase 3 e caspase 7 (ref.2).
O kit M30 Apoptosense ELISA mede os níveis solúveis dos fragmentos de
K18, após clivagem pela caspase, que contêm o neo-epitopoe K18Asp396.
Após a indução da apoptose das células epiteliais, o aumento de ccK18 é
primeiramente observado nos extractos celulares. A libertação do antigénio
no compartimento extracelular ocorre à posteriori e deve-se à necrose
secundária dos corpos apoptóticos. O aumento do ccK18 durante a apoptose
é inibido pelo caspase-inibidor zVAD-fmk (ref. 3).
O M30 Apoptosense ELISA pode ser utilizado em combinação com M65
ELISA (PEVIVA Prod. No. 10020) que mede a K18 total. A combinação dos dois
imunoensaios é útil na abordagem do modo da morte celular (ref. 4).
O kit M30 Apoptosense ELISA detecta o K18 humano clivado pela caspase, mas
não detecta o K18 de rato, ratinho ou canino clivado pela caspase (ref. 5). O kit
M30 Apoptosense ELISA detecta especificamente a apoptose de tumores em
ratos ou ratinhos com tumores humanos xeno enxertados.
M30 Apoptosense ELISA é para ser utilizado em investigação, diagnóstico
clinico e estudos clínicos nas áreas oncológicas, hepatológicas e transplantação.
Príncipio do Método
O M30 Apoptosense ELISA é um imunoensaio enzimático tipo sandwich de
fase sólida. Os calibradores, controlos e amostras reagem com o anticorpo
de captura M5 específico para K18 e com o anticorpo M30 conjugado com
peroxidase de rábano específico para o neo-epitopo K18Asp396. O conjugado
não ligado é removido no passo de lavagem. O substrato TMB é adicionado.
M30 Apoptosense® ELISA
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