Procedimento Del Test - peviva M30 Apoptosense ELISA Gebrauchsanweisung

Instruzioni per l'uso
Se il kit viene utilizzato più volte, conservare M30 HRP Conjugate diluito nella
fiala a 2–8 °C. Non esporre alla luce. La soluzione diluita M30 Conjugate è stabile
per 3 settimane.
La soluzione preparata della Wash Tablet rimane stabile per 5 settimane se con-
servata a 2 – 8 °C.

Procedimento del test

Il test con ELISA M30 Apoptosense deve essere eseguito a temperatura ambiente
(24 ± 3 °C).
1. Tutti i reagenti devono essere a temperatura ambiente prima di eseguire il
test. Agitare tutti i reagenti con scuotitore Vortex prima dell'uso.
2. Dissolvere la Wash Tablet in acqua fresca deionizzata (vedi "Preparazione del
componente").
3. Diluire M30 HRP Conjugate con M30 Conjugate Dilution Buffer e mescolare
(vedi "Preparazione del componente").
4. Pipettare 25 µl di M30 Standards (A–G), M30 Control Low, M30 Control High
e campione per pozzetto (si raccomandano duplicati).
5. Aggiungere 75 µl della soluzione diluita di M30 HRP Conjugate a ogni
pozzetto. Nota!
senza interruzioni, entro 20 minuti.
6. Coprire i pozzetti con del nastro sigillante o un coperchio apposito per
micropiastre.
7. Incubare sull'agitatore per quattro (4) ore. Velocità di agitazione: 600 rpm.
8. Lavare cinque volte la piastra nell'apposito dispositivo di lavaggio
delle micropiastre con 400–500 µl/pozzetto (lavaggio overflow)
oppure
lavare la piastra manualmente, scartando la soluzione di incubazione e la-
vando i pozzetti cinque (5) volte con 250 µl della soluzione preparata della
Wash Tablet. Evitare contaminazioni tra i pozzetti.
9. Aggiungere 200 µl di TMB Substrate a ogni pozzetto. Incubare al buio e a
temperatura ambiente per 20 ± 1 minuti.
10. Aggiungere 50 μl di Stop Solution a ogni pozzetto. Per consentire la
miscelazione completa di TMB Substrate con Stop Solution, agitare la
micropiastra per 5–10 secondi. Attendere 5 minuti prima di procedere alla
lettura dell'assorbenza.
11. Entro 30 minuti, determinare l'assorbenza a 450 nm mediante un lettore di
micropiastre e prendere nota dei risultati.
12. Calcolare i risultati come descritto nella sezione "Calcolo dei risultati
analitici".
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I passaggi 4 e 5 dovrebbero essere eseguiti sequenzialmente