Beskrivning Av Testet; Avsedd Användning; Sammanfattning Och Metodens Princip; Testprincip - peviva M30 Apoptosense ELISA Gebrauchsanweisung

Beskrivning av testet

Avsedd användning
M30 Apoptosense® ELISA är en enstegs in vitro-immunotest för kvantitativ
bestämning av apoptos-associerat caspasklyvt keratin 18 (ccK18, K18Asp396-
neoepitop eller M30-antigen) i serum och plasma.

Sammanfattning och metodens princip

Caspaser klyver olika proteiner under apoptos. I epiteliala celler utgörs ett av
dessa substrat av det intermediära filamentproteinet keratin 18 (K18). M30-
antikroppen känner igen en neoepitop som exponeras efter caspasklyvning
av K18 efter asparaginsyra 396 (ref. 1). Tidigt under apoptosprocessen klyver
caspas 9 vid denna position, för att därefter huvudsakligen klyvas av caspas 3
och caspas 7 i utförandefasen (ref. 2).
M30 Apoptosense ELISA mäter nivåerna av lösliga caspasklyvda K18-fragment
(ccK18) med K18Asp396-neoepitop. Efter induktion av apoptos av epiteliala
celler observeras först ökningar av ccK18-nivåerna i cellextrakt. Fri sättningen
av antigen till den extracellulära miljön sker senare och beror på sekundär nek-
ros av apoptotiska kroppar. Ökningen av ccK18-nivåerna under apoptos häm-
mas av bredspektrum-caspasinhibitorer som zVAD-fmk (ref. 3).
M30 Apoptosense ELISA kan användas i kombination med M65® ELISA (PEVIVA
prod. nr 10020) vilken mäter totalt K18. Kombinerad användning av de två
testerna möjliggör bestämning av huruvida celler har dött genom apoptos
eller nekros (ref. 4).
M30 Apoptosense ELISA mäter humant ccK18, men känner inte igen caspas-
klyvt K18 från möss, råttor eller hundar (ref. 5). Därför ger M30 Apoptosense
ELISA ett värde som är specifikt för tumörapoptosen i möss eller råttor som bär
en human xenografttumör (ref. 5).
M30 Apoptosense ELISA är avsedd för forskning och kliniska studier samt
klinisk diagnos inom områden onkologi, hepatologi och transplantation.

Testprincip

M30 Apoptosense
Standarder, kontroller och prover reagerar med fastfas-"capture"-antikroppen
M5 (riktad mot K18) och HRP- (pepparrotsperoxidas-) konjugerad M30-
antikropp riktad mot K18Asp396-neoepitop. Obunden konjugerad M30-
antikropp avlägsnas genom upprepade tvättar. TMB-substrat tillsätts.
ELISA är en
M30 Apoptosense® ELISA
fastfas-"sandwich"-enzymimmunotest.
En
Sv
De
Fr
It
Es
Sida 19