5 Durchführen eines Experiments
5.4 Durchführen des Prelabelings von Proben
Vorbereitungen vor dem Starten
des Prelabelings
Schritt
1
2
3
4
130
Maßnahme
Eines von jedem der folgenden Fläschchen (ausreichend für den Durch-
•
lauf von zwei Gelkarten) aus dem Gefrierfach herausnehmen:
1 Fläschchen Amersham WB Cy5
-
1 Fläschchen Amersham WB loading buffer
-
Die Prelabeling-Komponenten vollständig auftauen.
•
Das Cy5-Fläschchen vor dem Öffnen in das Gleichgewicht auf Raumtem-
•
peratur bringen, um die Kondensation von Feuchtigkeit zu vermeiden.
Die Cy5-Farbreagens-Flüssigkeit mit einer Zentrifuge kurz herunterzentrifu-
gieren.
Die Temperatur des Heizblocks auf 95 ºC einstellen.
Für eine reduzierende SDS-PAGE ein Reduzieragens zum Ladepuffer hinzu-
geben:
29 µl 1 M DTT-Stammlösung zu 0,7 ml (ein Fläschchen) Ladepuffer hinzu-
•
geben und zum Mischen kreisen lassen.
Amersham WB system Bedienungsanleitung 29-0214-77 AE