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3.5
Prelabeling-Verbrauchsmaterialien
Einführung
Die Prelabeling-Verbrauchsmaterialien werden für das Prelabeling von Proteinproben
mit einem fluoreszierenden Farbstoff verwendet.
Fluoreszenz-Prelabeling von Proben:
•
•
Wann soll das Prelabeling von
Proteinen eingesetzt werden?
Das Prelabeling von Proteinen wird bei folgenden Experimenten stets vor dem Elektro-
phorese-Schritt durchgeführt:
•
•
Prelabeling-Verbrauchsmaterialien
Vormarkierte Verbrauchsmaterialien werden in separaten Folienbeuteln verpackt. Jeder
Folienbeutel enthält Lösungsreagenzien, die zum Lauf von 10-Gelkarten ausreichen
(wobei 14 Streifen/Gelkarte mit vormarkierten Proben geladen werden), das heißt 140
individuelle Markierungsreaktionen.
Die nachstehende Tabelle fasst den Inhalt der Prelabeling-Verbrauchsmaterialien zusam-
men.
Prelabeling-Verbrauchsmaterial
Amersham WB Cy5
Amersham WB labeling buffer
(Markierungspuffer)
Amersham WB system Bedienungsanleitung 29-0214-77 AE
ermöglicht den Gesamtprotein-Nachweis beim Scannen der Gelkarte,
beseitigt die Notwendigkeit zur Nachfärbung des Gels.
Elektrophorese-Experimente,
Western Experimente mit Gesamtprotein-Normalisierung.
Inhalt
0,25 mg/ml (etwa 250
pmol/μl) Cy5-Farbstoff in
DMSO
SDS-haltiger tris-basierter
Puffer mit pH-Wert 8,7 (bei
25 °C)
3 Systembeschreibung
3.5 Prelabeling-Verbrauchsmaterialien
Menge
5 Fläschchen (blaue Kappe)
35 μl Cy5 Farbstofflösung pro
Ampulle (genug für zwei Gelkarten)
5 Fläschchen (schwarze Kappe)
0,7 ml Markierungs-Pufferlösung
pro Ampulle (ausreichend für zwei
Gelkarten)
65
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