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10
Alpha Technologie
10.1
Grundlagen
Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assays (AlphaScreen and AlphaLISA) sind Bead-
basierte, nicht radioaktive, homogene und empfindliche Assays, die sich hervorragend zur Untersuchung
biochemischer Wechselwirkungen eignen. Die Wechselwirkung zwischen Akzeptor- und Donor-Bead
erzeugt Licht: Bei Beleuchtung mit einer Hochenergie-Lichtquelle produzieren die lichtempfindlichen
Moleküle, die in den Donor-Beads enthalten sind, eine hohe Anzahl von Oxyradikalen. Diese Oxyradikale
bewegen sich zu den Akzeptor-Beads und lösen eine Reihe von Reaktionen aus, die letztlich zur
Erzeugung eines starken Chemolumineszenzsignals führt.
Werden Mehrfach-Akzeptor-Beads verwendet, die bei verschiedenen Wellenlängen emittieren, so können
mehrere Analyten in einem Well detektiert werden (AlphaPlex
10.2
Alpha Modul
Das Alpha Modul wird zur Detektion von Assays verwendet, die auf der Alpha Technologie basieren
(AlphaScreen
, AlphaLISA
®
erweiterten Lumineszenz Modul und dem Laser Modul verbunden mit einem berührungslosen IR
Temperatursensor.
10.2.1
Filter
Vordefinierte Filter für Alpha-basierte Applikationen sind verfügbar. Jeder Bandpassfilter wird aus einer
Kombination von Langpass- und Kurzpassfilter generiert, die in die Filterräder des erweiterten
Lumineszenz Moduls eingebaut sind. Folgende Tabelle zeigt die Wellenlängencharakteristik der
vordefinierten Bandpassfilter:
Alpha
Filter
Technologie
AlphaScreen
Langpassfilter: 520 nm, Kurzpassfilter: 620 nm
AlphaLISA
Langpassfilter: 610 nm, Kurzpassfilter: 635 nm
Langpassfilter: 610 nm, Kurzpassfilter: 635 nm,
AlphaPlex
Langpassfilter: 535 nm, Kurzpassfilter: 560 nm
10.2.2
Optik
Als Quelle des Anregungslichts für Alpha-basierte Assays wird ein Hochleistungslaser [1] verwendet. Die
Lumineszenz Faser [2] führt das Licht von der Probe durch die Filterräder [4] zum Detektor. Lang- und
Kurzpassfilter befinden sich in den Filterrädern. Entsprechende Filter-Kombinationen ergeben die
jeweiligen Bandpassfilter. Das Blendenrad [3] passt den Durchmesser des Lichtstrahls an die benutze
Wellgröße an.
Das Alpha Modul kann mit allen Plattenformaten verwendet werden, die das Gerät unterstützt.
Niedriges Lichtniveau nützt die Einzelphotonzählung des Detektors [5].
2021-06
Gebrauchsanweisung - Grundlagen - SPARK - Artikel Nr. 30124652 - Version 2.0
und AlphaPlex
). Das Alpha Modul besteht hauptsächlich aus dem
®
TM
).
TM
Zentrale
Wellenlänge/Bandbreite
570 nm/100 nm
622,5 nm/25 nm
622,5 nm/25 nm
547,5 nm/25 nm
75
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Fehlerbehebung
