Inhaltsverzeichnis
Werbung
Schäumen
Es ist jedoch äußerst wichtig, dass die Wippgeschwindigkeit ausreicht, um eine sichtbare
Oberflächenwelle zu erzeugen. Etwas Schaumbildung ist normal. Bei einer übermäßigen
Schaumbildung sollte die Wippgeschwindigkeit jedoch gesenkt werden, z. B. wenn über
50 % der Oberfläche mit Schaum bedeckt ist.
Es ist Standardpraxis, dem Kulturmedium 0,01 mg/l Pluronic™ F-68 hinzuzufügen, um
Schäden durch Schaumbildung auf ein Minimum zu begrenzen. Die meisten kommerzi-
ellen Zellkulturmedien enthalten bereits Pluronic.
Die Schaumbildung kann reduziert werden, indem der Wippwinkel verringert wird. Der
typische Wippwinkel liegt zwischen 6 und 8 Grad. Für stark schäumende Medien sollte
der Wippwinkel auf 4-5 Grad gesenkt werden. Zellen mit hohem Sauerstoffbedarf, wie
beispielsweise Insektenzellen, kann der Wippwinkel auf 9 Grad erhöht werden.
Übermäßige Schaumbildung tritt ebenfalls auf, wenn die Bioreaktorkammer nicht voll-
ständig aufgeblasen ist. Sicherstellen, dass ausreichende Luftströmung vorhanden ist
und das Überdruckventil funktioniert.
Probenentnahme
Sterilität
Der Kultur im Bioreaktor können Proben entnommen werden. Dazu wird eine Spritze mit
standardmäßigem Luer-Ansatz an dem speziellen nadelfreien Verbindungsstück ange-
schlossen. Beim Abziehen der Spritze verschließt ein Silikonseptum den Cellbag Bioreaktor
automatisch. Es ist nicht notwendig, das Verfahren in einer Sicherheitswerkbank mit
Laminarströmung durchzuführen.
Der Probeentnahme-Port erlaubt bis zu 50 Probenentnahmen, ohne dass die Sterilität
gefährdet wird. Die Probe ist auch vollständig abgeschlossen, da keine Aerosole abge-
geben werden.
Repräsentative Proben
Bei niedrigen Wippgeschwindigkeiten (15 U/min) ist es manchmal schwierig, repräsen-
tative Probe zu entnehmen, da sich die Zellen absetzen können. In dieser Situation wird
empfohlen, die Wippgeschwindigkeit vor der Probeentnahme 5 bis 10 Minuten lang auf
15 U/min zu erhöhen. Während der Probenentnahme wird die Wippbewegung angehalten.
Bei niedrigen Betriebsvolumen (unter 500 ml) kann es notwendig sein, zur Probennahme
etwas Luft aus dem Cellbag Bioreaktor zu entfernen. Nicht vergessen, den Cellbag Bio-
reaktor nach der Probenentnahme wieder auf den ursprünglichen Druck aufzublasen.
Xuri Cell Expansion System W5 Bedienungsanleitung 29-0569-96 AC
5 Betrieb
5.1 Hinweise für den Betrieb
53
Werbung
Inhaltsverzeichnis
