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Bedienung
6.3.2
Blottingsandwich zusammensetzen
Blottingsandwich für ein konti-
nuierliches Puffersystem
16
Anoden-Puffer I
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Anoden-Puffer II
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¡
Kathoden-Puffer
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Alternativer
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Kathoden-Puffer
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VORSICHT
Gefahr der Hautverletzung und Risiko für schlechte Blottingergebnisse
Hautkontakt mit den Chemikalien und der Membran kann zu Hautverletzungen führen.
Hautkontakt mit der Membran kann zum Hinterlassen von Fingerabdrücken und folglich
zu schlechten Blottingergebnissen führen.
¡ Tragen Sie Handschuhe beim Zusammensetzen des Blottingsandwiches und der
Handhabung der Membran!
HINWEIS
Vermeiden Sie den Einschluss von Luftblasen zwischen Membran, Blottingpapier und
Gel. Luftblasen können zu weißen Flecken auf der Membran führen.
Am Ende dieses Arbeitsschrittes sollte das für den Blottingvorgang vorbereitete Blot-
ting-Sandwich die Anordnung besitzen, wie sie in den nachfolgenden Abbildungen ge-
zeigt wird. Die Anordnung ist abhängig davon, ob ein kontinuierliches oder diskontinu-
ierliches Puffersystem zum Einsatz kommt.
Abb. 4
Blottingsandwich für ein kontinuierliches Puffersystem
1 Kathode im Deckel des Blottinggerätes
3 Gel
5 Filterpapier
300 mM Tris/HCl, pH 10,4
20 % (v/v) Methanol
25 mM Tris/HCl, pH = 10,4
20 % (v/v) Methanol
25 mM Tris/HCl, pH = 9,4
40 mM Capronsäure
20 % (v/v) Methanol
0,01 % SDS
40 mM D, L-Norleucin
(Norleucin unter Erwärmung auflösen. Stammlösung können auf
Grund der limitierten Löslichkeit nicht hergestellt werden!)
25 mM Tris/HCl, pH = 9,4
25 % (v/v) Methanol
1
2
3
4
5
6
2 Filterpapier
4 Membran
6 Anode im Gerätekorpus
Biometra Fastblot B43 & B44
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