Inhaltsverzeichnis
Werbung
Bedienung
Für gradientenfähige Modelle
52
Benutzer:
Admin
Polymerase Vorlage:
PCR-Methode:
Produktlänge:
Primer Annealingtemp.:
Ta = Tm - 5°C
Amplificationszyklus:
Grad. Inkr.:
Home
Abb. 29 Parameterseite des Protokoll Wizard
} Durch Antippen des Kontrollkästchens zwischen einem Zwei-Schritt und einem Drei-
Schritt Programm wählen. In einem Zwei-Schritt Programm sind Annealing und
Elongation in einem Schritt zusammengefasst.
} Die PCR-Produktlänge in bp (Basenpaare) angeben. Auf Grundlage der Produktlänge
berechnet die Software die Haltezeit für den Elongationsschritt.
} Wenn bekannt: Die Primer Annealingtemperatur in °C angeben.
Im Allgemeinen gilt: T
} Wenn die Annealingtemperatur nicht bekannt ist: Mit Calc Ta die Seite Primer edi-
tieren öffnen, um die Annealingtemperatur auf Grundlage der Nukleotidsequenz des
Vorwärts- und Rückwärtsprimers zu berechnen.
} Die gewünschte Anzahl an Zyklen eingeben.
Sie können einen Temperaturgradient festlegen. Dann können Sie mit dem PCR-Pro-
gramm, das Sie mithilfe des Wizards erstellen, die theoretische Annealingtemperatur
prüfen und weiteroptimieren.
} Die Schaltfläche Grad antippen.
ü Es öffnet sich ein zusätzliches Eingabefeld Grad. Inkr.:.
} Ein Temperaturinkrement eintragen.
} Wenn Sie alle Programmparameter gesetzt haben, mit Weiter die Seite Übersicht
Parameter öffnen. Die Seite zeigt die ermittelten Programmparameter.
Initiale Denaturierung
Denaturierung
30x
Annealing
Elongation
Final elongation
Final storage
Protokoll Wizard
InnuDry
Zwei Schritt
Drei Schritt
Grad
= T
– 5 °C
a
m
Temperatur
[°C]
95.0
95.0
55.0
72.0
72.0
16.0
Biometra TAdvanced
dd.mm.yyyy hh:mm
Zurück
Weiter
Haltezeit
(h:mm:ss)
0:02:00
0:00:02
0:00:02
0:00:06
0:01:00
∞
Werbung
Inhaltsverzeichnis
