Endress+Hauser Analytik Jena Biometra Minigel-Twin Bedienungsanleitung Seite 19

Biometra Minigel-Twin
6.2 Proben vorbereiten und auftragen
Proben vorbereiten
Proben auftragen
} Den Probenpuffer herstellen. Die nachfolgende Tabelle gibt die Bestand-
teile für einen SDS-Probenpuffer für SDS-PAGE Gele, unter denaturieren-
den Bedingungen, an:
Bestandteil
Tris/HCl (0,625 M, pH 6,8)
SDS
Glycerin
Β-Mercaptoethanol
Bromphenolblau (1 %ige Lösung in Ethanol)
Bidestilliertes Wasser
} Die Proben in Probenpuffer lösen. Den SDS-Probenpuffer im Verhältnis
1:1 mit der Probe vermischen.
} Die Proben gegebenenfalls 5 Minuten in einem kochenden Wasserbad
erhitzen.
ü Die Proben sind gelöst und können in die Geltaschen des Sammelgels
aufgetragen werden.
ð Die Elektrophoresekammer ist montiert und ein Glasplattensandwich
eingebaut.
} Falls die Proben mit Trichloressigsäure gefällt wurden: die gelösten Pro-
ben vor dem Auftragen mit Tris-Puffer neutralisieren.
} Die gelösten und bei Bedarf neutralisierten Proben nacheinander in die
Geltaschen des Sammelgels geben.
ü Die Proben sind aufgetragen. Die Elektrophorese kann gestartet wer-
den.
Menge
2,0 ml
0,2 g
5,0 ml
0,5 ml
0,1 ml
2,4 ml
Bedienung
19