Endress+Hauser Analytik Jena Biometra Minigel-Twin Bedienungsanleitung Seite 15

Biometra Minigel-Twin
Trenngellösung herstellen
Trenngellösung gießen
} Die Trenngellösung entsprechend der nachfolgenden Tabelle zusammen-
stellen:
Minigel-Twin
(6 ml + 0,035 ml, für 1
Gel mit 1,0 mm Spacern)
Stammlösung
(30 % Acrylamid, 0,8 %
Bisacrylamid)
Tris/HCl (1,88 M, pH 8,8)
SDS (0,5 %ig)
Bidestilliertes Wasser
Zugabe nachfolgender Bestandteile erst kurz vor Gießen des Geles
Ammoniumpersulfatlö-
sung (10 %ig)
TEMED
} Die Trenngellösung gut mischen.
} Bei Bedarf die Trenngellösung entgasen.
ü Die Trenngellösung ist hergestellt und kann in das Glasplattensand-
wich gegossen werden.
ð Das Glasplattensandwich ist zusammengebaut und mit Klammern befes-
tigt.
} Das mit Glasplattensandwich mittels der unteren Klammer auf einer waa-
gerechten ebenen Fläche aufstellen.
} Die Trenngellösung bei Bedarf entgasen.
} TEMED und Ammoniumpersulfat zur Trenngellösung dazugeben. Für die
Volumina an TEMED und Ammoniumpersulfat die Angaben in der weiter
oben dargestellten Tabelle beachten.
} Die Trenngellösung blasenfrei in den Hohlraum zwischen den beiden
Glasplatten pipettieren. Bis zu einer Höhe von 6 ... 6,5 cm pipettieren.
(Siehe Bild. Gel zur besseren Sichtbarkeit angefärbt.)
} Die Trenngellösung mit bidestilliertem Wasser überschichten.
} Die Trenngellösung für ca. 20 – 40 min bei Raumtemperatur polymeri-
sieren lassen.
ü Eine scharfe Trennlinie zwischen Trenngel und überschichtetem Was-
ser hat sich ausgebildet. Das Trenngel ist vollständig polymerisiert.
} Das bidestillierte Wasser vom Trenngel entfernen. Zum Entfernen ein
Filterpapier verwenden.
ü Das Trenngel ist bereit für den Einsatz. Das Sammelgel kann herge-
stellt und eingefüllt werden.
Acrylamidkonzentration
7,5 % 10,0 % 12,5 %
1,5 ml 2,0 ml 2,5 ml
1,2 ml 1,2 ml 1,2 ml
1,2 ml 1,2 ml 1,2 ml
2,1 ml 1,6 ml 1,1 ml
30 µl 30 µl 30 µl
5 µl 5 µl 5 µl
Bedienung
15,0 % 17,5 %
3,0 ml 3,5 ml
1,2 ml 1,2 ml
1,2 ml 1,2 ml
0,6 ml 0,1 ml
30 µl 30 µl
5 µl 5 µl
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