Hinzufügen Einer Phix-Kontrolle (Optional); Laden Von Verbrauchsmaterialien In Die Kartusche; Vorbereiten Der Kartusche; Laden Der Fließzelle - illumina NextSeq 2000 Handbuch

NextSeq 2000-Sequenziersystem Handbuch
Hinzufügen einer PhiX-Kontrolle (optional)
1. Mischen Sie die folgenden Volumina in einem Low-Binding-Röhrchen, um 20 µl 1-nM-PhiX
vorzubereiten:
•
10-nM-PhiX (2 µl)
•
RSB (18 µl)
2. Mischen Sie kurz mit dem Vortexer und zentrifugieren Sie anschließend eine Minute lang bei
280 × g.
3. Fügen Sie 1 µl 1-nM-PhiX zu 24 µl auf die endgültige Ladekonzentration verdünnter Bibliothek hinzu.
Diese Volumina ergeben ein PhiX-Spike-in von ca. 2 %. Der tatsächliche Prozentsatz ist abhängig
von der Qualität und Quantität der Bibliothek.
4. Lagern Sie die Bibliothek mit PhiX-Spike-in bis zur Sequenzierung auf Eis.
Sequenzieren Sie Bibliotheken mit PhiX-Spike-in am Tag der Verdünnung.

Laden von Verbrauchsmaterialien in die Kartusche

Mit diesem Schritt werden die vorgefüllten Reagenzien gemischt und die verdünnten Bibliotheken sowie
die Fließzelle geladen, um die Kartusche für die Sequenzierung vorzubereiten.

Vorbereiten der Kartusche

1. Öffnen Sie den Beutel der Kartusche, indem Sie ihn an einer der Einkerbungen aufreißen oder mit
einer Schere aufschneiden.
2. Nehmen Sie die Kartusche aus dem Beutel heraus. Entsorgen Sie Beutel und Trocknungsmittel.
3. Invertieren Sie die Kartuschen zehnmal, um die Reagenzien zu mischen.
Die internen Komponenten können beim Invertieren rasseln, was normal ist.
Laden der Fließzelle
1. Öffnen Sie die Verpackung aus Silberfolie, indem Sie sie an einer der Einkerbungen aufreißen oder
mit einer Schere aufschneiden.
Dokument-Nr. 1000000109376 v00 DEU
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in Diagnoseverfahren.
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