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Verwandte Anleitungen für Agilent BioHPLC

Inhaltszusammenfassung für Agilent BioHPLC

  • Seite 29: Erste Schritte

    DEUTSCH Dieser Leitfaden enthält allgemeine Informationen zu den Agilent BioHPLC- und AdvanceBio-Säulen für die Umkehrphasen-Chromatographie. Weiterführende Informationen zu bestimmten Phasen oder Produktfamilien finden Sie unter: www.agilent.com/chem/biocolumnchoices Erste Schritte Jeder Agilent Säule ist ein QC-Leistungsprotokoll mit Testchromato gramm beigefügt. Das für die QC-Tests eingesetzte...

  • Seite 30: Säulenkonditionierung

    • 1.8-µm-Säulen (ZORBAX RRHD) können nur in der Flussrichtung betrieben werden, die auf der Säule angegeben ist. • Agilent empfiehlt Polyketon-Fittings (Best.-Nr. 5042-8957) für Säulen bis zu 600 bar und abnehmbare 1200-bar-Fittings (Best.-Nr. 5067-4733) für Säulen, die bei UHPLC-Drücken betrieben werden.

  • Seite 31: Wichtige Sicherheitshinweise

    Toxizität und Brennbarkeit der eingesetzten mobilen Phasen geeignete Sicherheitsvorkehrungen treffen. • Aufgrund der geringen Partikelgröße bildet trockenes Packungsmaterial der Säulen einatembare Stäube. Agilent empfiehlt daher, die Endfittings nicht zu entfernen, damit das Packungsmaterial nicht freigesetzt werden kann. Die Säulen dürfen nur von geschultem Personal unter einem Abzug geöffnet werden.
  • Seite 32 Sie zunächst darauf, dass die Säule nicht mit einer mobilen Phase beschickt wird, die Ausfällungen bewirkt oder nicht vollständig mischbar ist. • Agilent BioHPLC- und AdvanceBio-Säulen sind mit allen gängigen Eluenten kompatibel, die für die Analyse von Biomolekülen geeignet sind.
  • Seite 33 DEUTSCH Tabelle 2: Säulen-Betriebsparameter – pH-Wert und Temperatur Empfohlener Maximale Säule pH-Bereich Betriebstemperatur AdvanceBio Peptide Mapping 2.0-8.0 60 ºC AdvanceBio Peptide Plus ZORBAX RRHD 1.0-8.0 80 ºC ZORBAX 300SB-C8, C3, CN ZORBAX 300SB-C18 AdvanceBio RP-mAb 1.0-8.0 90 ºC Poroshell 300 Poroshell 300 Extend-C18 2.0-11.0 60 °C unter pH 8,...

  • Seite 34: Empfohlene Anfangsgradienten

    DEUTSCH Auswahl der mobilen Phase und Betriebstemperaturen Gebundene stationäre Phasen sind unpolar und sind am besten in Kombination mit polaren mobilen Phasen wie z. B. Methanol/Wasser- oder Acetonitril/Wasser-Mischungen zu verwenden. Eine Erhöhung des organischen Anteils verkürzt die Retentionszeit der Probe. Wenn Sie die Säule längere Zeit bei maximaler Temperatur einsetzen, verkürzt sich ihre Lebensdauer.
  • Seite 35 Eluenten frisch anzusetzen und vor dem Gebrauch zu filtrieren. Weiterführende Informationen über Vorsäulen finden Sie unter www.agilent.com/chem/guards Säule reinigen und Lebensdauer verlängern Rückspülbare Säulen (Partikel > 1.8 µm) werden in umgekehrter Richtung gereinigt. Beginnen Sie mit einem stärkeren (weniger polaren) Lösungsmittel.

  • Seite 36: Empfehlungen Zur Aufbewahrung

    DEUTSCH Reinigung der Säule und Verlängerung der Lebensdauer (Fortsetzung) 5. Verwerfen Sie die Säule, oder wählen Sie eine wirksamere Lösungsmittelmischung, z. B. 75 % Acetonitril/25 % Isopropanol. 6. Erhöhen Sie auf 100 % Isopropanol, 100 % Methylenchlorid oder 100 % Hexan. (Wenn Sie Methylenchlorid oder Hexan verwenden, müssen Sie die Säule vor dem Gebrauch und vor dem Übergang zu Ihrer mobilen Phase mit Isopropanol spülen, da diese Lösungsmittel nicht mit wässrigen Lösungen mischbar sind).

  • Seite 37: Tipps Für Optimale Chromatographieergebnisse

    Sie das Totvolumen und die Bandenverbreiterung. Verwenden Sie für Fast LC/High Efficiency LC-Säulen rote Kapillaren (0.12 mm Innendurchmesser). Weitere Informationen zu unseren Kapillaren unter www.agilent.com/chem/lccapillaries • Optimieren Sie die Datenerfassungsrate für Ihre Säule. Verwenden Sie für Fast LC-Säulen (ZORBAX RRHD) eine höhere Erfassungsrate.

Diese Anleitung auch für:

Advancebio

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