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Thermo Fisher Scientific
9. Stellen Sie das Instrument so ein, dass das zweite Ponceau S
Volumen dispensiert wird. Drücken Sie die Schaltfläche
PRIME, um die Schläuche vorzudispensieren. Setzen Sie die
zweite leere 96-Well-Platte (Mikroplatte B) in den Plattenträger
ein. Dispensieren Sie das zweite Volumen in jedes Well der
Platte (Tabelle 6-12).
10. Dispensieren Sie das Instrument mit Tween (0,02 % v/v) vor.
Dispensieren Sie die Tween-Lösung in jedes Well der beiden
Mikroplatten. Verwenden Sie in diesem Schritt die niedrige
Dispensiergeschwindigkeit, um die Schaumbildung
zu verringern. Dispensieren Sie das entsprechende Volumen
laut Tabelle 6-11. Beachten Sie, dass das maximale Volumen
mit der Kassette für kleine Schläuche 50 µl beträgt. Sie müssen
die entsprechenden Aliquots mehrmals dispensieren. Wenn Sie
die Standardschlauchkassette verwenden, können Sie das
gesamte Volumen in einem Zug dispensieren.
11. Schütteln Sie die Platte 15 Sekunden vor der Messung
im Mikroplatten-Lesegerät oder im Instrument. Messen Sie den
Abs
test
Mikroplatten mit einem Mikroplattenphotometer mit einem
Messbereich von 0 bis 2 Abs und einer Auflösung von 0,001 Abs.
Fügen Sie eine Tabelle mit den Wert Abs
12. Berechnen Sie die durchschnittliche Absorption für jede der
beiden Mikroplatten:
Abs
mean
13. Notieren Sie den Wert von Abs
Mikroplatten in Tabelle 6-12.
14. Berechnen Sie die Ergebnisse der Standardabweichung für jede
Mikroplatte mit Hilfe der folgenden Gleichung oder der Funktion
STDEVP in Microsoft
wissenschaftlichen Taschenrechner, und notieren Sie die
Ergebnisse in Tabelle 6-12.
Standardabweichung= √ (( ∑ (Abs
15. Berechnen Sie den Variationskoeffizienten, CV%, für die
Standardabweichung, die Sie für jede Mikroplatte erhalten haben,
und halten Sie die Ergebnisse unter Tabelle 6-12 fest.
Vergleichen Sie die CV%-Werte mit den Kriterien auf
Tabelle 6-11.
CV% = (Standardabweichung Abs
Thermo Scientific Multidrop Combi+ und Multidrop Combi SMART+ Benutzerhandbuch
Überprüfen und Neukalibrieren der Dispensierkassette
, die Absorption jedes Wells bei 540 nm, in beiden
= mittlere Extinktion der einzelnen Wells = ∑ Abs
Excel
Kalibrierung der Dispensierkassette
an Tabelle 6-12 an.
test
für jede der beiden
mean
oder der Funktion σ in einem
– Abs
)
/ 96 )
2
test
mean
/ Abs
) x 100
test
mean
÷ 96
test
91
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